[发明专利]细胞培养物中因子Ⅷ多肽滴度的提高

权利要求书

1.一种生产因子VIII多肽的方法，所述方法包括以下步骤：a) 在用于表达所述因子VIII多肽的条件下培养表达因子VIII多肽的哺 乳动物细胞，所述培养条件包括包含O-磷酸-L-丝氨酸的细胞培养基， 和b)通过合适的方法从哺乳动物细胞分离表达的因子VIII多肽。

2.一种生产因子VIII多肽的方法，所述方法包括以下步骤：a) 在用于表达所述因子VIII多肽的条件下培养表达因子VIII多肽的哺 乳动物细胞，所述培养条件包括细胞培养基，和b)通过合适的方法从 哺乳动物细胞分离表达的因子VIII多肽，所述合适的方法包括向所述 细胞添加O-磷酸-L-丝氨酸。

3.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中O-磷酸-L-丝氨 酸以0.1-100mM的浓度存在于细胞培养基。

4.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中在步骤b)中向细 胞添加浓度为1-200mM的O-磷酸-L-丝氨酸。

5.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中所述细胞培养基 还包括大豆胰蛋白酶抑制剂。

6.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中所述细胞培养基 还包括植物蛋白水解物。

7.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中所述哺乳动物细 胞选自内源性表达因子VIII多肽的哺乳动物细胞和已经转染因子VIII 多肽基因的哺乳动物细胞。

8.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中所述哺乳动物细 胞已经转染包括编码因子VIII多肽的核酸分子及与其可操作连接的 表达调控区的表达载体。

9.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中所述细胞培养基 不含血清。

10.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中从细胞培养基 收集表达的因子VIII多肽而且不降低细胞的生存力。

11.如权利要求10所述的方法，其中利用相同批次的细胞连续生 产。