[发明专利]免疫检定中由抗碳水化合物抗体引起的干扰的消除

说明书

技术领域

本发明针对大致说来用于检测抗药物抗体并且具体说来用于检测药物具有碳水化合物部分的抗药物抗体的检定。本发明还针对大致说来用于检测药物并且具体说来用于检测具有碳水化合物部分的药物的检定。本发明进一步针对鉴别适于利用含有碳水化合物部分的药物治疗的个体的方法。

背景技术

糖蛋白被越来越多地应用于治疗和诊断癌症、感染和免疫疾病。具体说来，来自各种物种的单克隆抗体以及嵌合或“人源化”抗体是临床上获得越来越多使用的糖蛋白类别。当对个体投与时，患者有时会对这些抗体产生免疫应答。由治疗前与治疗后输注抗体的血清或血浆的反应性之间的差异来确定所述应答。

管理机构需要监测和定量接受治疗的患者体内对于药物和或蛋白质的人免疫应答。然而，在一些情况下，人血清或血浆对单克隆抗体的给药前反应性很高，并且可能干扰针对糖蛋白的特异性免疫应答的监测和定量。此外，还注意到，未曾暴露于用作治疗剂的某些抗体的个体通常在利用治疗性蛋白质时会展现治疗前血清反应性。这种反应性可归因于人血清或血浆中存在对抗体且具体说来对所投与的糖蛋白的碳水化合物部分具有反应性的“天然抗体”。(例如，参看罗伯特G.汉密尔顿(Robert G.Hamilton)和N.弗兰克林安德金森(N.Franklin Adkinson)，天然存在的碳水化合物抗体：固相免疫检定中的干扰(Naturally Occurring Carbohydrate Antibodies：Interference in Solid-PhaseImmunoassays).免疫方法杂志(Journal of Immunological Methods)，77(1985)95-108.)；“汉密尔顿(Hamilton)”)。另外，还观察到，抗碳水化合物抗体可充当免疫检定中干扰的来源。朱斯图斯安德多因(Justus Adédoyin)，S.G.O.乔纳森(S.G.O.Johansson)，汉斯哥罗伦德(Hans)，玛瑞尼范汉格(Marianne van Hage).免疫检定中对动物蛋白的碳水化合物部分具有特异性的人IgM所造成的干扰(Interference inimmunoassays by human IgM with specificity for the carbohydrate moiety of animal proteins).免疫方法杂志(Journal of Immunological Methods)，310(2006)117-125)。

汉密尔顿揭示出，可利用对中性抗体具有反应性的可溶性或固相碳水化合物预先吸附个体血清，从而去除这些中性抗体对人血清免疫检定分析中的碳水化合物造成的干扰。另外，美国专利第5,856,106号中揭示一种通过使糖蛋白治疗之后从个体获得的体液样品与已修饰成具有经氧化的碳水化合物部分的糖蛋白接触，来测定经糖蛋白治疗的个体中对于所述糖蛋白的特异性免疫应答水平的方法。

由于当将糖蛋白作为治疗剂投与时，利用糖蛋白所产生的治疗前血清反应性可能掩蔽或增大对于所述糖蛋白的实际免疫应答，故需要在评定潜在治疗性糖蛋白的免疫反应性之前降低所述反应性。

发明内容

本发明报导具有碳水化合物部分的药物存在治疗前血清反应性，其中所述碳水化合物部分不与糖蛋白直接缔合。已发现，包含药物加里刹霉素(calicheamicin)与使加里刹霉素靶向一种或多种特定细胞类型的单克隆抗体的结合物的药物-载体结合物可与治疗前或原生人类和猴血清反应。治疗前反应性是特异性针对药物-载体结合物的加里刹霉素部分，并且具体说来是针对加里刹霉素的碳水化合物部分。另外还发现，在治疗前血清中提供其它碳水化合物可去除血清与加里刹霉素的背景反应性。

因此，一方面，本发明提供一种检测含有抗体的流体样品中针对含有碳水化合物部分的药物的抗体的存在的检定，所述检定包含以下步骤：组合(i)所述样品与(ii)含有碳水化合物部分的药物和(iii)其它碳水化合物；和检测所述样品中的抗体与含有碳水化合物部分的药物之间是否发生特异性结合；其中所述含有碳水化合物部分的药物不包含糖蛋白。

另一方面，本发明提供一种检测含有抗体的流体样品中含有碳水化合物部分的药物的存在的检定，所述检定包含：组合(i)所述样品与(ii)特异性结合所述含有碳水化合物部分的药物的捕获剂和(iii)其它碳水化合物；和检测所述样品中含有碳水化合物部分的药物与所述捕获剂之间是否发生特异性结合；其中所述含有碳水化合物部分的药物不包含糖蛋白。