[发明专利]配体亲和性改变的G蛋白偶联型受体以及其用途

权利要求书

1.一种蛋白复合物，其特征在于，所述蛋白复合物是GPCRα_1A与以 下的多肽复合而成，所述多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

2.一种脂质膜，其特征在于，所述脂质膜含有根据权利要求1所述 的蛋白复合物。

3.一种根据权利要求2所述的脂质膜的制作方法，其特征在于，所 述制作方法包括使GPCRα_1A与以下的多肽共存于脂质膜上的步骤，所述 多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

4.一种转化体细胞，其特征在于，所述转化体细胞表达根据权利要 求1所述的蛋白复合物。

5.一种根据权利要求4所述的转化体细胞的制作方法，其特征在于， 所述制作方法包括使GPCRα_1A与以下的多肽在细胞中共表达的步骤，所 述多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

6.一种改变GPCRα_1A的配体亲和性的方法，其特征在于，所述方法 包括使GPCRα_1A与以下的多肽共存于脂质膜上的步骤，所述多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

7.一种筛选配体亲和性改变的GPCRα_1A的激动剂或者拮抗剂的方 法，其特征在于，所述筛选方法包括：

使GPCRα_1A与以下的多肽在细胞中共表达的步骤，以及

将该细胞与候选因子一起进行培养的步骤；

还包括：

测定该细胞的细胞内Ca²⁺浓度的步骤、或者测定细胞内肌醇磷酸的代 谢的步骤，以及，

确定该候选因子是否为对于GPCRα_1L的激动剂或拮抗剂的步骤：

将通过上述培养步骤之后所进行的测定而得到的值，与通过上述培养 步骤之前所进行的测定而得到的值进行比较，在增加的情况下，确定上述 候选因子为对于GPCRα_1L的激动剂，

将通过上述培养步骤之后对于GPCRα_1L的激动剂存在的情况下所进 行的测定而得到的值，与通过上述培养步骤之前所进行的测定而得到的值 进行比较，在无变化的情况下，确定上述候选因子为对于GPCRα_1L的拮抗 剂；

所述多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

8.一种表达配体亲和性改变的GPCRα_1L的转化体的制作方法，其特 征在于，所述制作方法包括在表达GPCRα_1L的细胞中抑制以下多肽的表 达的步骤，所述多肽为：

(1)由序列号1所记载的氨基酸序列构成的多肽；或

(2)由序列号2所记载的碱基序列构成的多核苷酸编码的多肽。

9.根据权利要求8所述的制作方法，其特征在于，所述多肽为内源 性蛋白质。

10.根据权利要求8所述的制作方法，其特征在于，抑制所述多肽的 表达的步骤是利用RNAi法进行的。

11.根据权利要求10所述的制作方法，其特征在于，所述RNAi法是 通过导入由序列号5所示的碱基序列构成的寡核苷酸而进行的。

12.根据权利要求8所述的制作方法，其特征在于，所述细胞是表达 外源性的GPCRα_1L的转化体。