[发明专利]配体亲和性改变的G蛋白偶联型受体以及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种配体亲和性改变的G蛋白偶联型受体以及其用途，更 详细来说，本发明涉及一种通过与特定的蛋白质形成复合物而改变了配体 亲和性的G蛋白偶联型受体以及其用途。

背景技术

生物体内的许多反应是由细胞外的信息传导到细胞内而引起的。关于 膜受体，G蛋白偶联型受体(G Protein Coupled Receptor，GPCR)广为人 知，该G蛋白偶联型受体是将细胞外的信息传递到细胞内的入口之一，且 具有7个跨膜区。

GPCR如果与配体(氨基酸、肽、蛋白质、胺类等)结合，则通过三 聚体G蛋白将所述信息传递到细胞内。与GPCR偶联的G蛋白被分为Gs、 Gi、Gq等，各自对应的效应通路(例如环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)通路、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate， cGMP)通路、磷脂酶C(Phospholipase C，PLC)通路等)不同。例如， α₁肾上腺素受体主要与Gq偶联而促进作为效应器系统的磷脂酶C系统， 使甘油二酯和肌醇三磷酸增加，使细胞内Ca²⁺增加；α2肾上腺素受体与 Gi偶联而抑制腺苷酸环化酶系统，使cAMP减少。另外，β肾上腺素受体 与Gs偶联而促进作为效应器系统的腺苷酸环化酶系统，使cAMP增加。

GPCR在生物体内的局部存在区域是根据各受体而不同。例如，α₁肾 上腺素受体局部存在于血管平滑肌、前列腺等，对它们的收缩发挥重要作 用。另外，也已知晓此α₁肾上腺素受体也分布在脑等中枢神经系统中。β 肾上腺素受体局部存在于心脏、脂肪组织等中，对心搏加快、脂肪分解发 挥重要作用。

已知，通过GPCR的信息传递系统控制生物体的恒常性，并且参与多 种疾病的发病。因此，鉴定参与特定疾病的发病的GPCR，并开发出调节 该受体的活性的药剂(激动剂、拮抗剂等)，对于疾病的治疗非常有效。

[非专利文献1]

Muramatsu，I.et al.Br.J.Pharmacol.，99：197(1990)

[非专利文献2]

Muramatsu，I.et al.Pharmacol.Commun.，6：23(1995)

[非专利文献3]

Morishima，S.et al.J.Urol.117：377-381(2007)

[非专利文献4]

Molenaar，P.and Parsonage，W.A.Trends Pharmacol.Sci.，26：368-375 (2005)

[非专利文献5]

Samaha，A.N.et al.，J.Neurosci.27：2979-2986(2007)

发明内容

与GPCR相关的研究颇为进步，迄今为止已鉴定出了大量的GPCR。 但是，也存在虽然知晓表型但实体不明的GPCR。例如已知，α₁肾上腺素 受体根据其基因而被分为α_1A、α_1B、α_1D三种亚型，α₁肾上腺素受体中，表 现出与这些亚型不同表型(药理学特性)的亚型(α_1L)是由相同的基因表 达。具体来说，该α_1L亚型对具代表性的α₁阻断剂(例如哌唑嗪(prazosin)) 的亲和性较低，仅利用组织切片结合法就可以检测到其活性(参照非专利 文献1～3)。另外已知，β₁肾上腺素受体中，表现出不同表型的亚型(β_1H与β_1L)也是由相同的基因表达(参照非专利文献4)。这样的亚型是仅知 晓表型，但其实体不明。多巴胺受体、毒蕈碱受体或者内皮素受体也被指 出存在同样的情况(参照非专利文献5等)。

本发明是鉴于所述问题研发而成，其目的在于提供一种对实体不明的 G蛋白偶联型受体的功能进行分析的技术。