[发明专利]C5抗原及其用途

说明书

发明背景

黄斑变性是主要存在于老年成人中的医学病症，其中眼衬里的中心(称 作视网膜斑点区)遭受变薄、萎缩并在一些情况下出血。这会导致中央视 觉丧失，包括不能看到细微的细节、不能阅读或不能识别脸部。对新脉络 膜血管形成的病理学了解较少，但是认为下述因素是重要，例如炎症、缺 血和生血管因子的局部生产。

已经确定补体系统蛋白质的基因与人发生黄斑变性的风险密切相关。 补体系统是先天免疫抵抗微生物感染的关键性组件，并且包含一组通常以 失活状态存在于血清中的蛋白质。这些蛋白质以经典通路、凝集素通路和 旁路通路这三种活化通路组织在一起。微生物表面上的分子能够活化这些 通路，导致形成称作C3-转化酶的蛋白酶复合物。经典通路是钙/镁依赖性 的级联，其通常通过抗原-抗体复合物的形成被活化。经典通路也可以通过 与配体复合的C-反应性蛋白质的结合和通过许多病原体(包括革兰氏阴性 细菌)，以不依赖于抗体的方式被活化。旁路通路是镁依赖性的级联，其通 过某些易感表面(例如酵母和细菌的细胞壁多糖，和某些生物多聚体材料) 上C3的沉积和活化被活化。

旁路通路参与经典通路和凝集素通路活性的增加。补体通路的活化产 生补体蛋白质例如C3a、C4a和C5a过敏毒素和C5b-9膜攻击复合物(MAC) 的具有生物活性的片段，所述片段介导涉及以下的炎性应答：白细胞趋化 性、巨噬细胞，嗜中性粒细胞，血小板，肥大细胞和内皮细胞的活化、提 高的血管渗透性、细胞溶解和组织损伤。

补体组件C5是补体级联中凝集素通路、经典通路和旁路通路共有的 最终通路的主要组件。旁路通路和经典通路C5转化酶对C5的切割产生 C5b和C5a片段。C5a和C5b片段均为促炎症反应分子。C5a是强效的过 敏毒素。C5a与C5a受体(C5aR)结合并刺激促炎症反应细胞因子例如 TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8从人白细胞中合成和释放。C5b发挥C5b-9 (C5b、C6、C7、C8和C9)装配的成核位点的作用，所述C5b-9也已知 为终端补体复合物或穿透细胞膜形成孔的膜攻击复合物(MAC)，其在亚裂 解(sublytic)浓度下可有助于促炎症反应细胞活化，但是在裂解(lytic)浓度下 导致细胞死亡。还原C5b-9(MAC)的形成和C5a的产生可能是抑制促成 AMD的炎症应答所需要的。抑制由旁路通路和经典通路的C5转化酶催化 的C5切割可能对AMD的治疗是至关重要的。

尽管对于治疗与经典或旁路补体通路(尤其是AMD)相关的疾病和 病症存在治疗选择，但是仍然需要发现导致有效和充分耐受的治疗的特异 靶标。

发明概述

本发明涉及C5蛋白质(包括选自SEQ ID 1-6的序列)、其片段以及 制备或使用所述蛋白质的方法。本发明还涉及包含C5多核苷酸和多肽的 载体和重组宿主细胞。本发明的另一方面提供了用于鉴定调控C5补体组 件活性的测试试剂的方法，和用于鉴定C5抗原的结合配偶体的方法。本 发明的分离的C5蛋白质的有用性基于C5特异表位的发现，所述表位涉及 与补体活性失调特别是黄斑变性相关的生物活性。

本发明提供了C5蛋白质或其片段作为免疫原而产生结合分子从而预 防、治疗和/或延迟涉及补体通路活性失调的疾病或病症的用途，所述结合 分子与选自SEQ ID 1-6的至少一个C5表位结合。

在其他方面中，本发明提供了抑制旁路补体通路至少一个组件的结合 分子，并且包括制备或使用所述结合分子用于预防、治疗和/或延迟眼部疾 病或病症例如AMD的方法。

在某些其他方面中，本发明提供了治疗或预防眼部疾病或病症、或延 迟其发展的方法，所述方法包括施用有效量的抗体，所述抗体与一个或多 个C5表位特异结合，从而抑制需要这类治疗的受试者补体通路系统中的 C5蛋白质功能。

在本发明的另一方面中，提供了治疗性或预防性治疗方法中使用的药 物组合物，所述组合物包含补体C5功能的蛋白质抑制剂，C5b与C6结合 的蛋白质抑制剂或其可药用盐，以及一种或多种可药用稀释剂或运载体。

本发明还提供了能够抑制旁路补体通路的结合分子在制备下述药物中 的用途，所述药物用于治疗眼部疾病或病症，或用于延迟它们的发展，其 中蛋白质能够抑制C5蛋白质功能或MAC复合体的生产。