[发明专利]评估细胞和细胞培养物的方法

权利要求书

1.一种评估细胞培养物组成的方法，所述方法包括：

a)从所述细胞培养物获得多个细胞；

b)测定成纤维细胞标志物MFAP5在所述多个细胞中的平均表达水平； 并

c)根据MFAP5的平均表达水平来确定所述培养物的组成，

其中低于预定阈值的MFAP5平均表达水平指明所述细胞培养物包含软 骨细胞。

2.权利要求1的方法，进一步包括测定软骨细胞标志物HAPLN1在所述多 个细胞中的平均表达水平；并在步骤c)中，根据HAPLN1的平均表达水 平和MFAP5的平均表达水平来确定所述培养物的组成，其中(i)大于 0.25的HAPLN1与MFAP5的表达水平比率或(ii)大于0.55的HAPLN1与 MFAP5的摩尔比率指明所述细胞培养物含有软骨细胞。

3.权利要求2的方法，其中MFAP5和HAPLN1的表达水平是在RNA水平测 定的。

4.权利要求3的方法，其中所述表达水平是使用PCR测定的。

5.权利要求4的方法，其中所述表达水平是使用比较C_T PCR方法测定的。

6.权利要求2的方法，其中大于0.25的HAPLN1与MFAP5的表达水平比率指 明所述细胞培养物含有至少50％的软骨细胞。

7.权利要求2的方法，其中大于0.55的HAPLN1与MFAP5的摩尔比率指明所 述细胞培养物含有至少50％的软骨细胞。

8.权利要求1的方法，其中所述细胞培养物包含自软骨活组织检查获得的 细胞。

9.权利要求8的方法，其中所述软骨活组织检查是自膝关节采集的。

10.权利要求8的方法，其中对所述细胞培养物评估后，给有所需要的患者 施用来自所述细胞培养物的细胞。

11.权利要求10的方法，其中来自所述培养物的细胞用于自体软骨细胞植 入。

12.一种评估细胞培养物组成的方法，所述方法包括：

a)从哺乳动物获得软骨活组织检查；

b)从所述活组织检查分离细胞；

c)在细胞培养物中培养步骤b)中所分离的细胞；

d)获得所述细胞培养物的样品；

e)测定MFAP5和HAPLN1在一个或多个来自所述样品的细胞中的表 达水平；并

f)根据MFAP5和HAPLN1的表达水平来确定所述培养物的组成，其中

(i)大于0.25的HAPLN1与MFAP5的表达水平比率或(ii)大于0.55的 HAPLN1与MFAP5的摩尔比率指明所述细胞培养物含有软骨细胞。

13.权利要求12的方法，其中所述MFAP5和HAPLN1的表达水平是在RNA水 平测定的。

14.权利要求13的方法，其中所述表达水平是使用PCR测定的。

15.权利要求14的方法，其中所述表达水平是使用比较C_T PCR方法测定的。

16.权利要求12的方法，其中大于0.25的HAPLN1与MFAP5的表达水平比率 指明所述细胞培养物含有至少50％的软骨细胞。

17.权利要求12的方法，其中大于0.55的HAPLN1与MFAP5的摩尔比率指明 所述细胞培养物含有至少50％的软骨细胞。

18.权利要求2的方法，其中计算HAPLN1与MFAP5的表达水平比率来确定 所述培养物的组成。

19.权利要求2的方法，其中计算HAPLN1与MFAP5的摩尔比率来确定所述 培养物的组成。

20.权利要求12的方法，其中计算HAPLN1与MFAP5的表达水平比率来确定 所述培养物的组成。

21.权利要求12的方法，其中计算HAPLN1与MFAP5的摩尔比率来确定所述 培养物的组成。