[发明专利]调节LRRK2的方法

权利要求书

1、一种鉴定预期用于调节LRRK2蛋白激酶活性的化合物的方法，该方法包 括下列步骤：(1)确定测试化合物是否调节LRRK2多肽在底物埃兹蛋白/根蛋白/ 膜突蛋白(ERM)家族多肽上的蛋白激酶活性，及(2)选择调节所述LRRK2多 肽蛋白激酶活性的化合物。

2、一种鉴定预期用于调节，例如抑制细胞中的ERM家族多肽的磷酸化的化 合物的方法，该方法包括下列步骤：(1)测定测试化合物是否调节，例如抑制 LRRK2多肽的蛋白激酶活性，及(2)选择调节，例如抑制LRRK2多肽的蛋白激 酶活性的化合物。

3、一种鉴定预期用于治疗或预防帕金森病(PD)或帕金森综合症或其它神经 变性状况的化合物的方法，该方法包括下列步骤：(1)测定测试化合物是否调节， 例如抑制ERM家族(例如膜突蛋白)多肽的磷酸化，及(2)选择调节，例如抑 制ERM家族(例如膜突蛋白)多肽的磷酸化的化合物。

4、根据权利要求3所述的方法，其包括下列步骤：(1)确定测试化合物是否 调节，例如抑制通过LRRK2多肽的ERM家族(例如膜突蛋白)多肽的磷酸化， 及(2)选择调节，例如抑制通过LRRK2多肽的ERM家族(例如膜突蛋白)多肽 的磷酸化的化合物。

5、根据权利要求1-4任一项所述的方法，其中LRRK2多肽是野生型人类 LRRK2或其片段，或其二者之一的融合体。

6、根据权利要求5所述的方法，其中该片段至少含有野生型人类LRRK2的 残基1326-2527。

7、根据权利要求1-5任一项所述的方法，其中LRRK2多肽是具有野生型人 类LRRK2天然存在突变的人类LRRK2，或其片段，或其二者之一的融合体。

8、根据权利要求7所述的方法，其中人类LRRK2的天然存在突变是与帕金 森病(PD)相关的突变。

9、根据权利要求7或8所述的方法，其中该突变用野生型人类LRRK2编号 而言是G2019S。

10、根据权利要求7或8所述的方法，其中该突变中用野生型人类LRRK2编 号而言是R1441C、R1441G、Y1699C、R1914H、I2012T、I2020T、T2356I、G2385R、 K544E、P755L、R793M、Q930R、S973N、R1067Q、S1096C、I1122V、S1228T、 I1371V、R1441H、A1442P、R1514Q、M1869T或G2019S。

11、根据权利要求7-10任一项所述的方法，其中该片段至少对应于人类LRRK2 的残基1326-2527。

12、根据前述权利要求任一项所述的方法，其中LRRK2多肽是GST融合多 肽。

13、根据权利要求12所述的方法，其中LRRK2多肽是GST-LRRK2[1326-2527， G2019S]。

14、根据前述权利要求任一项所述的方法，其中LRRK2多肽和/或ERM家族 多肽是重组体。

15、根据前述权利要求任一项所述的方法，其中ERM家族多肽是源于ERM 家族多肽，例如膜突蛋白、根蛋白或埃兹蛋白的片段，其含有对应于膜突蛋白 Thr558残基的残基和至少部分包括该残基的周围序列，例如至少该残基的C-末端 和N-末端的2、3、4、5、6或7个残基，例如多肽RLGRDKYKTLRQIRQ或 RLGRDKYKTLRQIRQGNTKQR；或在100、80、60、50、40、30、25、20、19、 18、17或16个氨基酸以下的多肽，其含有氨基酸序列RLGRDKYK(T/S)LRQIRQ 或RLGRDKYK(T/S)LRQIRQGNTKQR，每个多肽没有或具有达1、2、3、4、5、 6、7、8、9或10个保守的或非保守的不是T/S残基的残基替代。

16、一种纯化的制备物或部分的试剂盒，其包含LRRK2多肽或多核苷酸和 ERM家族多肽或多核苷酸。