[发明专利]半连续和连续酶促水解方法

权利要求书

1.一种区域选择性酶促水解底物的方法，包括在半连续或连续式方法中使底物 的缓冲溶液流过固定化酶，其中所述底物是吡喃糖苷或呋喃糖苷，从而所述底物的可 水解基团被区域选择性酶促水解，且其中所述可水解基团是保护为酯基、氨基酸酯基、 磷酸酯基的醇基团。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物包含可水解的受保护伯和 仲醇基团，并且其中所述伯或仲酯基被区域选择性水解。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述缓冲溶液以0.1毫升/分钟-50 毫升/分钟，或0.5毫升/分钟-10毫升/分钟的流速流过所述固定化酶。

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述底物选自：

式中R独立地为H、烷基、羟基、羟基烷基、-NR′R″、-SR″′、卤代；

R′和R″独立地为烷基、-SR″′、-SOR″′、-SO₂R″′；

R″′独立地为H、烷基、芳基；

R¹独立地为H、-C(O)R³、外消旋的、L-或D-氨基酸基团-C(O)CH₂NHR⁴、 -C(O)CH(C_1-6烷基)NHR⁴、磷酸酯基；

R³是C_1-18烷基；

R⁴是H、-C(O)CH(C_1-6烷基)NH₂、或-C(O)CH(CH₂-芳基)NH₂；

B是核碱基；以及

X、Y和Y′独立地为-CH₂-、-CHR′-、-CR′R″-或O、NR″′、S，其中R′和R″独立 地为烷基和R″′是H或烷基或CO(Z)，Z是O-烷基或NH-烷基或N-(烷基)₂。