[发明专利]互补决定区（CDRs）功能人源化

说明书

优先权

本申请要求2007年5月16日提交的美国临时专利申请第60/930,371号的权益， 该申请的全部内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及重组免疫球蛋白的构建方法。更具体而言，其涉及应用获自灵长类或 者人类数据库的相应互补决定区(CDRs)序列置换亲本免疫球蛋白的CDR序列，所 述亲本免疫球蛋白比如鼠免疫球蛋白。由此构建的免疫球蛋白可视为CDR-人源化的 免疫球蛋白。

背景

Kohler和Milstein于1975年描述了使用细胞融合技术，用以从免疫的小鼠制备 单克隆抗体，这是抗体技术发展历程中的重要里程碑。单克隆抗体具有高度特异性， 结合并对疾病特异靶点发挥效应，而不影响机体正常细胞，因而较之非特异的化学药 物具有较少的毒副作用。鼠抗CD3单克隆抗体OKT3是美国FDA于1986年批准的 第一个治疗性抗体，用于预防器官移植排异反应。由于鼠源单克隆抗体所具有的一系 列内在缺陷，如半衰期短、不能激发人体效应子功能以及人抗小鼠抗体反应(即， HAMA应答)，严重阻碍了治疗性抗体的发展步伐。

80年代至90年代期间，随着其它抗体工程技术的出现，例如啮齿动物抗体的抗 体嵌合技术(参见例如：美国专利4,816,567，其通过引用并入本文)和人源化抗体 技术(参见例如：美国专利5,225,539，5,585,089，5,693,762，5,693,761，其通过引 用并入本文)、噬菌体展示组合文库技术(参见例如：Clackson et al.，Nature，352： 624-628(1991)；Felici et al.，J Mol.Biol.，223：301-310(1991)；Markland et al.Gene， 109：13-19(1991))、产生人抗体的huMab/Xeno鼠(参见例如：美国专利6,075,181， 6,150,584；和7,041,870，其通过引用并入本文)，以及相关的抗体生产技术，终于展 现出单克隆抗体的治疗前景。1997年获准上市的利妥昔(Rituximab)是首个肿瘤治 疗性单克隆裸抗体，它成为开创治疗性抗体先河的标志。迄今已有超过23个治疗性 抗体获得美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市，还有数百个候选抗体正在进行 临床试验阶段的评估。

首先，抗体通过与靶抗原在独特的和特异的位点结合来工作。其通过阻断靶细胞 与配体的不期望的作用(参见如ReoPro(abciximab)、Remicade(Infliximab，英夫 利昔单抗)和Humira(adalimumab，阿达木单抗)等)，或者通过介导免疫效应子功 能来清除不需要的细胞如肿瘤细胞(参见如Rituxan(rituximab)、Herceptin (trasuzumab，赫赛汀)和Campath-1(alemtuzumab)等，从而发挥治疗功效。因为 抗体的靶向特异性，其他人已将抗体用作载荷化学药物的输送载体(如Mylotarg (gemtuzumab))或放射性核素(如Zevaline(ibritumomab)，和Bexxar(tositumomab))， 导向至靶细胞而发挥细胞毒性清除效应。治疗性抗体以其独有的靶向特异性、确证的 临床疗效和安全性，为实现最佳的疾病诊断、治疗和其他产业化应用，开辟了无限发 展空间。