[发明专利]可变切向流过滤

权利要求书

1.通过切向流过滤浓缩免疫球蛋白溶液的方法，其特征在于跨膜压力 和横向流是可变的：

i)在待浓缩溶液最高达每ml 30mg免疫球蛋白的浓度范围中，1.4巴 至1.6巴的跨膜压力和75ml/分钟至90ml/分钟的横向流，

ii)在15mg/ml至高达55mg/ml的浓度范围中，0.8巴至0.9巴的跨膜 压力和140ml/分钟至160ml/分钟的横向流，

iii)在45mg/ml至高达275mg/ml的浓度范围中，0.8巴至0.9巴的跨 膜压力和120ml/分钟至140ml/分钟的横向流，

其中待浓缩溶液中的免疫球蛋白的实际浓度决定所施加的跨膜压力和 横向流，

其中所述切向流过滤应用具有20至50kDa分子量截断值的膜，并且

其中所述免疫球蛋白溶液具有pH3.0至pH10.0的pH值。

2.权利要求1的方法，其特征在于步骤iii)中的浓度范围是45mg/ml 至高达130mg/ml。

3.权利要求1的方法，其特征在于跨膜压力和横向流是：

-步骤i)中1.5巴和80ml/分钟，

-步骤ii)中0.85巴和150ml/分钟，和/或

-步骤iii)中0.85巴和130ml/分钟。

4.用于生产异源免疫球蛋白的方法，其包括以下步骤：

a)提供重组哺乳动物细胞，其包含一种或多种编码异源免疫球蛋白的 核酸；

b)在适于表达该异源免疫球蛋白的条件下培养所述的细胞；

c)从所述重组哺乳动物细胞或培养基回收异源免疫球蛋白；

d)应用具有可变跨膜压力和横向流的切向流过滤浓缩所获得的包含所 述异源免疫球蛋白的水性、缓冲溶液，

其中术语“异源免疫球蛋白”表示不是由哺乳动物细胞天然产生的免疫 球蛋白，

其特征在于步骤d)包括应用具有以下可变跨膜压力和横向流的切向流 过滤浓缩所获得的水性、缓冲溶液：

i)在待浓缩溶液最高达每ml 30mg异源免疫球蛋白的浓度范围中，1.4 巴至1.6巴的跨膜压力和75ml/分钟至90ml/分钟的横向流，

ii)在15mg/ml至高达55mg/ml浓度范围中，0.8巴至0.9巴的跨膜压 力和140ml/分钟至160ml/分钟的横向流，以及

iii)在45mg/ml至高达275mg/ml的浓度范围中，0.8巴至0.9巴的跨 膜压力和120ml/分钟至140ml/分钟的横向流，

其中待浓缩溶液中的免疫球蛋白的实际浓度决定所施加的跨膜压力和 横向流，

其中所述切向流过滤应用具有20至50kDa分子量截断值的膜，并且

其中所述免疫球蛋白溶液具有pH3.0至pH10.0的pH值。

5.权利要求4的方法，其特征在于在步骤d)之前或步骤d)之后包括以 下步骤：

e)纯化含有所述异源免疫球蛋白的水性、缓冲溶液。

6.权利要求1的方法，其特征在于所述免疫球蛋白是完全免疫球蛋白、 或免疫球蛋白片段、或免疫球蛋白缀合物。

7.权利要求4的方法，其特征在于所述异源免疫球蛋白是完全免疫球 蛋白、或免疫球蛋白片段、或免疫球蛋白缀合物。

8.权利要求4的方法，其特征在于所述哺乳动物细胞是CHO细胞、 BHK细胞、HEK细胞、Sp2/0细胞或细胞。

9.权利要求1或4的方法，其特征在于所述pH值为pH3.0至pH7.0。

10.权利要求1或4的方法，其特征在于可以在重叠浓度范围中的任意 浓度值改变跨膜压力和横向流。

11.权利要求1或4中任何一项的方法，其特征在于所述浓度范围是： 步骤i)中为5至25mg/ml，步骤ii)中为25至50mg/ml，以及在步骤iii) 中为50至140mg/ml。