[发明专利]α-1-抗胰蛋白酶和载脂蛋白A-I的纯化方法

权利要求书

1.一种方法，该方法用于将载脂蛋白A-I(ApoA-I)以及α-1-抗胰蛋白酶(AAT) 从含有这两种蛋白的单一的起始人血浆部分中纯化，该方法包括：

a)对于被用作起始材料的起始人血浆部分进行处理，这样使得ApoA-I以及 AAT二者均被溶解，其中起始人血浆部分选自：多个Cohn部分IV中的一种或多种、 来自Kistler-Nitschmann上清液A以及A+I的沉淀、或硫酸铵沉淀；

b)在等于或低于10℃的温度，通过添加乙醇直至浓度为8-14％v/v并且该溶 液的pH调整到5至6来使ApoA-I从该溶液沉淀，这样使得ApoA-I沉淀而AAT保持在 溶液中；

c)将沉淀的ApoA-I从该含有AAT的溶液中分离；并且

d)在一个或多个处理步骤中分别将ApoA-I以及AAT纯化至药物级纯度。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述方法用于大规模纯化。

3.如权利要求1所述的方法，其中该一种或多种Cohn部分IV是Cohn部分IV₁。

4.如权利要求1所述的方法，其中AAT和ApoA-I未暴露于13.69或以上的pH。

5.如权利要求1所述的方法，其中AAT和ApoA-I未暴露于13或以上的pH。

6.如权利要求1所述的方法，其中AAT和ApoA-I未暴露于12或以上的pH。

7.如权利要求1所述的方法，其中AAT和ApoA-I未暴露于11或以上的pH。

8.如权利要求1所述的方法，其中起始人血浆部分是在步骤a)中溶解在缓冲液 中，该缓冲液包括50mM-150mM Tris以及0mM至20mM NaCl而处于8.0至10.0的 pH。

9.如权利要求1所述的方法，进一步包括减少病毒的步骤。

10.如权利要求9所述的方法，其中减少病毒的步骤包括在大约60℃的巴斯德杀菌 处理。

11.如权利要求10所述的方法，其中巴斯德杀菌步骤是在包括至少40％w/w的蔗糖 以及至少4％w/w的乙酸钾的溶液中进行的。

12.如权利要求9所述的方法，其中该减少病毒的步骤包括通过可以除去病毒颗粒 的过滤器的过滤处理。