[发明专利]多系祖细胞分化为软骨细胞

权利要求书

1.软骨细胞的克隆群。

2.一种组合物，该组合物含有权利要求1所述的软骨细胞克隆群和培养基。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物还含有低温保存剂。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述低温保存剂是二甲亚砜(DMSO)。

5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述低温保存剂是1-10％DMSO。

6.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述低温保存剂是胎牛血清，人血清，或人血清白蛋白与DMSO、海藻糖和葡聚糖中的一种或多种的组合。

7.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述低温保存剂是人血清、DMSO和海藻糖；或者是胎牛血清和DMSO。

8.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述软骨细胞的克隆群容纳于胶原包涂的培养设备内。

9.一种制品，其含有权利要求1所述的克隆群。

10.如权利要求9所述的制品，其特征在于，所述克隆群容纳于容器内。

11.如权利要求10所述的制品，其特征在于，所述容器是小瓶或袋。

12.如权利要求10所述的制品，其特征在于，所述容器还含有低温保存剂。

13.如权利要求9所述的制品，其特征在于，所述克隆群容纳于胶原包涂的培养设备内。

14.一种组合物，其含有人胎血多系祖细胞(MLPC)的纯化群或人胎血MLPC克隆系和有效诱导所述MLPC分化成具有软骨细胞表型的细胞的分化培养基，其中所述MLPC呈CD9阳性、CD45阴性、CD34阴性和SSEA-4阴性。

15.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述分化培养基含有抗坏血酸、地塞米松和TGF-β3。

16.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述组合物还含有生长基底。

17.如权利要求16所述的组合物，其特征在于，所述生长基底包涂有胶原。

18.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述生长基底是胶原包涂的培养设备。

19.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述MLPC还呈CD13、CD29、CD44、CD73、CD90和CD105阳性，和呈CD10、CD41、Stro-1和SSEA-3阴性。

20.如权利要求19所述的组合物，其特征在于，所述MLPC还呈CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD22、CD33、CD36、CD38、CD61、CD62E、CD133、血型糖蛋白-A、干细胞因子和HLA-DR阴性。

21.一种制备具有软骨细胞表型的细胞群的方法，所述方法包括：a)提供胶原包涂的二维生长基底，该基底容纳纯化的MLPC群或MLPC克隆系；和用能有效诱导所述MLPC分化成具有软骨细胞表型的细胞的分化培养基培育所述纯化的MLPC群或MLPC克隆系，其中，所述MLPC呈CD9阳性、CD45阴性、CD34阴性和SSEA-4阴性。

22.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述分化培养基含有抗坏血酸、地塞米松和TGF-β3。

23.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述生长基底是胶原包涂的培养设备。

24.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述方法还包括测试所述具有软骨细胞表型的细胞的胞内聚集蛋白聚糖、胞内II型胶原、胞内SOX9或细胞表面的TGF-β受体。

25.如权利要求21所述的方法，其特征在于，所述MLPC还呈CD13、CD29、CD44、CD73、CD90和CD105阳性，和呈CD10、CD41、Stro-1和SSEA-3阴性。