[发明专利]针对β淀粉样肽的人源化抗体

说明书

技术领域

本发明涉及抗体技术的领域，更具体地涉及针对β-淀粉样肽的人源化抗体的领域。

背景技术

阿尔茨海默氏病(AD)是年龄相关的神经变性失调，在2006年其影响了2660万人。一些预测预计，到2050年，发病率将是四倍，到时，在世界范围内每85人中有1人将患有该疾病(Brookmeyer et al.(2007))。AD自身显现为渐进性的认知缺陷，例如记忆丧失和认知能力的降低。

AD的病理的中心是脑部β-淀粉样肽(Abeta)的积累。Abeta是淀粉样前体蛋白质(APP)的裂解产物，其在淀粉样变性途径中首先被β-分泌酶、然后被γ分泌酶相继裂解。产生的Abeta片段具有可变的大小，而40个氨基酸的肽(Abeta₄₀)是最丰富的种类，42个氨基酸的肽(所谓的Abeta₄₂)被认为是最有害的种类。Abeta可以在脑的细胞外隙中积累，在此它在多步骤的过程中聚集，形成神经毒性寡聚体，最后与其他物质一起产生淀粉样斑块，其是阿尔茨海默氏病的典型标志。

治疗阿尔茨海默氏病的有前景的临床免疫学方法是被动免疫，在其中，针对Abeta的抗体被施用给受试者来从脑从除去Abeta。已经提出了通过抗Abeta抗体的三种不同但不互相排斥的Abeta清除机制：(1)纤维状Abeta向较低毒性形式的催化转化(Bard et al.(2000)；Bacskai et al.(2001)；Frenkelet al.(2000))；(2)Abeta沉积的调理作用，引起小胶质细胞吞噬作用(Bardet al.(2000)；Bacskai et al.(2002)；Frenkel et al.(2000)；和(3)促进Abeta从脑向循环的流出(DeMattos et al.(2001))，所谓的外周沉没假说。

苏黎士大学的Mohajera等人(2004)和Gaugler等人(2005)产生了针对Abeta的小鼠抗体，并研究了单克隆鼠抗Abeta抗体在体内的生物活性。

然而，当施用给人类时，鼠抗体常常产生免疫原性。引发的抗球蛋白反应限制了鼠抗体的临床实用性(Miller et al.(1983)；Schroff et al.(1985))。

因此，需要新的、非免疫原性的和有效的抗体，用于Abeta相关疾病、特别是阿尔茨海默氏病的治疗和/或诊断。

发明内容

因此，本发明的一般目的是提供特异性结合Abeta(特别是Abeta的C-末端部分)的且被人类免疫系统良好地耐受的抗体。

在第一个方面，本发明提供了分离的抗体，其选择性地在C-末端区域与Abeta结合，特别是氨基酸30到40(SEQ ID NO：26)之间，并且是人源化的或完全人类的。所述抗体展示了对Abeta₄₂和Abeta₄₀的高亲和力，此外，在体内基本上不识别淀粉样前体蛋白质(APP)。

所谓的人源化抗体的优点在于它们引发人类免疫系统的一般是最小的反应、或没有反应的能力，因而可以被认为是在人类施用时是低免疫原性的或非免疫原性的。因而，与鼠抗体相反，人源化的抗体适合于治疗目的和临床应用。

术语“人源化”是指降低异种抗体的免疫原性的公认的技术。人源化抗体被遗传工程化，从而存在尽可能少的非人类结构。一种策略是基于异种抗体的互补决定区(CDR)移植到人类接受体框架的可变轻链VL和可变重链VH上。在另一种策略中，异种抗体的框架向人类框架突变。在两种情况中，抗原结合部分的功能的保存是关键的。为了这个目的，例如，通过使用技术人员公知的分子建模的计算机程序，分析亲本序列和各种概念上的人源化产物的三维模型。所述分析，除其它之外例如允许鉴定可能直接或间接涉及抗原结合的框架残基。通常，少量的供体框架残基对于抗原结合是重要的，因为它们进入与抗原的直接接触，或者它们影响特定CDR的构象(Davies et al(1990)；Chothia et al(1987))。因此，如果尚不存在，希望的是朝着被鉴定为对于抗原结合重要的那些供体框架残基来突变相应的接受体框架残基。还可能的是，人源化抗体包含既不在体内的人类种系全集(repertoire)中、也不在供体CDR或甚至供体框架中存在的残基。