[发明专利]β-氨基酸的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种β-氨基酸的制造方法，所述β-氨基酸的制造 方法包括在氨基酸氨基变位酶(amino acid aminomutase)的存在下 由α-氨基酸合成β-氨基酸的步骤。

背景技术

已知β-氨基酸作为药物中间体是有用的化合物。以前为了立体 选择性地得到β-氨基酸，采用通过光学离析消旋体β-氨基酸来离 析纯化目标立体异构体的方法。但是，如果采用该方法，理论收率 为50％，较低，是步骤多且烦杂的制造方法，所以得到的β-氨基酸 也变得昂贵。因此，期待开发出可以实现高效率化及低价格化的β- 氨基酸的制造方法。

近年，报道了氨基酸氨基变位酶的存在，所述氨基酸氨基变位 酶催化以L-氨基酸为基质合成β-氨基酸的反应，所述L-氨基酸可 以比较廉价地得到。

例如非专利文献1中报道了一种方法，所述方法利用来自东北红 豆杉(Taxus caspidata)的苯基丙氨酸氨基变位酶由L-苯基丙氨酸 合成(R)-β-苯基丙氨酸。

另外，非专利文献2中报道了一种方法，所述方法利用来自球孢 链霉菌(Streptomyces globisporus)的酪氨酸氨基变位酶由L-酪氨 酸合成β-酪氨酸。

另外，非专利文献3中报道了一种方法，所述方法利用来自成团 泛菌菌株Eh335(Pantoea agglomerans strain Eh335)的AdmH由L-苯 基丙氨酸合成β-苯基丙氨酸。

非专利文献1：Biochemistry，46(2007)9785-9794

非专利文献2：Biochemistry，42(2003)12708-12718

非专利文献3：Nature，448(2007)824-827

非专利文献4：J.Am.Chem.Soc.，129(2007)6988-6989

发明内容

但是，上述现有技术在任何情况下均以赋予酶的特征为目的合 成β-氨基酸，预测其反应收率及产量低，进而在离析纯化中必须进 行烦杂的操作，因此不能说是工业上有利的方法。β-氨基酸是作为 药品原料等有用的化合物，期待开发出高效地进行酶反应本身的制 造方法。

本发明的目的在于在利用酶反应的β-氨基酸的制造方法中高 效地制造β-氨基酸。

根据本发明，提供一种β-氨基酸的制造方法，所述β-氨基酸 的制造方法包括在氨基酸氨基变位酶的存在下由α-氨基酸合成β- 氨基酸的步骤，其特征在于，在反应液中使β-氨基酸作为固体析出。

根据本发明，通过使β-氨基酸作为固体析出，可以高效地进行 利用氨基酸氨基变位酶的酶反应，进而可以通过从反应液中收集固 体而容易地纯化生成物。

根据本发明，提供一种可以高效地制造β-氨基酸的方法。

具体实施方式

本发明的实施方式为芳香族β-氨基酸的制造方法。上述制造方 法包括在芳香族氨基酸氨基变位酶的存在下由芳香族α-氨基酸合 成芳香族β-氨基酸的步骤，在反应液中使芳香族β-氨基酸作为固 体析出。

作为芳香族氨基酸氨基变位酶，例如可以举出苯基丙氨酸氨基 变位酶、酪氨酸氨基变位酶。在苯基丙氨酸氨基变位酶中，可以举 出S体选择性苯基丙氨酸氨基变位酶、R体选择性苯基丙氨酸氨基变 位酶。

在本说明书中，“S体选择性苯基丙氨酸氨基变位酶”是指具有S 体选择性苯基丙氨酸氨基变位酶活性的蛋白质。另外，“S体选择性 苯基丙氨酸氨基变位酶活性”是指可以S体选择性地合成β-苯基丙 氨酸。“S体选择性”是指β-苯基丙氨酸中含有的(S)-β-苯基丙 氨酸的光学纯度为50％ee以上，但优选为80％ee以上，更优选为90 ％ee以上，最优选为99％ee以上。

另外，在本说明书中，“R体选择性苯基丙氨酸氨基变位酶”是指 具有R体选择性苯基丙氨酸氨基变位酶活性的蛋白质。另外，“R体选 择性苯基丙氨酸氨基变位酶活性”是指可以R体选择性地合成β-苯 基丙氨酸。“R体选择性”是指β-苯基丙氨酸中含有的(R)-β-苯 基丙氨酸的光学纯度为50％ee以上，但优选为80％ee以上，更优选为 90％ee以上，最优选为99％ee以上。

作为芳香族α-氨基酸，例如可以举出L-苯基丙氨酸、L-酪氨 酸及它们的类似物。