[发明专利]具有与γ磷酸结合的电活性标记的核苷三磷酸

权利要求书

1.一种核苷三磷酸结合物，含有电活性标记的γ磷酸基团。

2.根据权利要求1所述的核苷酸，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团选自包括有机标记的γ磷酸基团和有机金属标记的γ磷酸基团的组。

3.根据权利要求1所述的核苷酸，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团是金属茂，包括取代的金属茂。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述金属茂选自由二茂铁、二茂钴及其任意衍生物组成的组。

5.根据权利要求1所述的核苷酸，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团选自由醌和硝基杂环组成的组。

6.根据权利要求1至5所述的核苷酸，其特征在于所述核苷三磷酸包括腺苷-5′-三磷酸(ATP)及其核苷酸衍生物。

7.根据权利要求6所述的核苷酸，其特征在于所述核苷酸衍生物包括取代的腺苷衍生物。

8.针对权利要求1至7所述的核苷酸的抗体。

9.根据权利要求8所述的抗体，其特征在于所述抗体被标记。

10.一种检测底物磷酸化的方法，其特征在于所述方法包括：

(a)在电极表面固定所述底物；

(b)用含激酶的电解液和含电活性标记的γ磷酸的核苷三磷酸结合物孵育固定的所述底物；

(c)检测所述底物的磷酸化。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述底物包含单个或多个磷酸化位点。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于在所述底物中的所述磷酸化位点包括酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基。

13.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述激酶包括丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶和酪氨酸激酶。

14.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述底物是候选激酶底物，其中所述候选底物的磷酸化指示所述候选物是所述激酶的底物。

15.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团选自包括有机和有机金属标记的γ磷酸基团的组。

16.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团是金属茂，包括取代的金属茂。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于所述金属茂选自由二茂铁、二茂钴及其任意衍生物组成的组。

18.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述电活性标记的γ磷酸基团选自由醌和硝基杂环组成的组。

19.根据权利要求10至18所述的方法，其特征在于所述核苷三磷酸包括腺苷-5′-三磷酸(ATP)及其核苷酸衍生物。

20.根据权利要求19所述的方法，其特征在于所述核苷酸衍生物包括取代的腺苷衍生物。

21.根据权利要求10至20所述的方法，其特征在于所述电极选自由丝网印刷金电极、金微电极、金微电极阵列芯片、碳电极和ITO电极组成的组。

22.根据权利要求10至21所述的方法，其特征在于所述磷酸化通过电化学进行检测。

23.根据权利要求10至21所述的方法，其特征在于所述磷酸化通过质谱检测。

24.一种检测样品中感兴趣的激酶的方法，其特征在于所述方法包括：

(a)在电极表面上固定所述感兴趣的激酶的特异性底物；

(b)用所述样品和含有电活性标记的γ磷酸的核苷三磷酸结合物孵育固定的所述底物；以及

(c)检测所述底物的磷酸化，

其中所述底物的磷酸化指示所述样品中存在所述激酶。

25.根据权利要求24所述的方法，其特征在于所述底物包括单个或多个磷酸化位点。

26.根据权利要求25所述的方法，其特征在于在所述底物中的所述磷酸化位点包括酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基。

27.根据权利要求24所述的方法，其特征在于所述感兴趣的激酶包括丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或酪氨酸激酶。