[发明专利]提高糖蛋白唾液酸化作用的组合物与方法

权利要求书

1.一种细胞系，所述细胞系包括至少一种编码非细胞质唾液酸酶的染色体整合的核酸序列的受破坏的表达，所述唾液酸酶的氨基酸序列选自由以下组成的组：(a)与SEQ ID NO：2至少约95％同一的序列，和(b)与SEQ ID NO：4至少约80％同一的序列。

2.如权利要求1所述的细胞系，其中所述氨基酸序列选自由以下组成的组：(a)与SEQ ID NO：2至少约97％同一的序列，和(b)与SEQ IDNO：4至少约90％同一的序列。

3.如权利要求1所述的细胞系，其中所述氨基酸序列主要由选自SEQID NO：2和SEQ ID NO：4组成的组的序列组成。

4.如权利要求1所述的细胞系，其中所述氨基酸序列由选自SEQ IDNO：2和SEQ ID NO：4组成的组的序列组成。

5.如权利要求1所述的细胞系，其中所述核酸序列的表达通过选自以下组成的组的技术破坏：RNA干扰、同源重组和位点特异性重组。

6.如权利要求5所述的细胞系，其中RNA干扰(RNAi)通过选自以下组成的组的RNAi剂介导：短干扰RNA、短发夹RNA和RNAi表达载体。

7.如权利要求1所述的细胞系，其中所述细胞系选自由昆虫细胞系、哺乳动物细胞系、啮齿动物细胞系、非人灵长类动物细胞系和人类细胞系组成的组。

8.如权利要求1所述的细胞系，其中所述细胞系是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。

9.如权利要求8所述的细胞系，其中所述唾液酸酶由SEQ ID NO：2组成。

10.如权利要求8所述的细胞系，其中所述唾液酸酶由SEQ ID NO：4组成。

11.如权利要求8所述的细胞系，其中所述唾液酸酶由SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4组成。

12.如权利要求1所述的细胞系，所述细胞系还包括编码细胞质唾液酸酶的染色体整合的核酸序列的受破坏的表达，所述细胞质唾液酸酶的氨基酸序列与SEQ ID NO：5至少约85％同一。

13.如权利要求12所述的细胞系，其中氨基酸序列主要由SEQ IDNO：5组成。

14.如权利要求12所述的细胞系，其中氨基酸序列由SEQ ID NO：5组成。

15.如权利要求12所述的细胞系，其中所述核酸序列的表达通过选自以下组成的组的技术破坏：RNA干扰、同源重组和位点特异性重组。

16.如权利要求16所述的细胞系，其中RNA干扰(RNAi)通过选自以下组成的组的RNAi剂介导：短干扰RNA、短发夹RNA和RNAi表达载体。

17.如权利要求12所述的细胞系，其中所述细胞系选自由昆虫细胞系、哺乳动物细胞系、啮齿动物细胞系、非人灵长类动物细胞系和人类细胞系组成的组。

18.如权利要求12所述的细胞系，其中所述细胞系是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。

19.如权利要求18所述的细胞系，其中所述非细胞质唾液酸酶由SEQID NO：2组成。

20.如权利要求18所述的细胞系，其中所述非细胞质唾液酸酶由SEQID NO：4组成。

21.如权利要求18所述的细胞系，其中所述非细胞质唾液酸酶由SEQID NO：2和SEQ ID NO：4组成。

22.一种生产糖蛋白的方法，所述方法包括在细胞中表达编码所述糖蛋白的核酸序列，所述细胞包括至少一种编码非细胞质唾液酸酶的染色体整合的核酸序列的受破坏的表达，所述唾液酸酶的氨基酸序列选自以下组成的组：(a)与SEQ ID NO：2至少约95％同一的序列，和(b)与SEQ IDNO：4至少约80％同一的序列，其中所述糖蛋白相对于适当对照，具有增加的唾液酸化作用。

23.如权利要求22所述的方法，其中所述唾液酸酶的氨基酸序列选自由以下组成的组：(a)与SEQ ID NO：2至少约97％同一的序列，和(b)与SEQ ID NO：4至少约90％同一的序列。