[发明专利]用于检测生物靶点的快速和灵敏的方法

权利要求书

1.一种在靶位点沉积报道子的方法，所述方法包括在包含报道子和交联剂的介质中孵育靶位点，其中所述靶位点具有过氧化物酶活性，其中所述报道子为可检测分子，以及其中所述交联剂是包含至少两个过氧化物酶的底物部分的分子。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述过氧化物酶活性与所述靶位点中存在的至少一个过氧化物酶部分有关。

3.权利要求2所述的方法，其中所述过氧化物酶选自辣根过氧化物酶(HRP)或大豆过氧化物酶(SP)。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述交联剂为具有下式的分子：

(R1)n-(X)q-R2(m)，

其中

R1和R2为过氧化物酶的底物的部分，

X为连接基团或化学键，以及

m、n和q为1至10的整数。

5.根据权利要求4所述的方法，其中

R1和R2为邻苯二胺的部分，

X为共价键，以及

m、n和q为1。

6.根据权利要求4所述的方法，其中

R1和R2为阿魏酸的部分，

X为具有下式的连接基团：

其中R3和R4为氨基酸赖氨酸的残基，和

m和n为2至10的整数，

以及q为1至10的整数。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述交联剂在所述介质中的存在量为约10^-5至约10^-2M。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述报道子为包含骨架聚合物和至少一种可检测物质的分子，其中所述至少一种可检测物质通过化学键或通过连接基团与所述骨架聚合物相连。

9.根据权利要求9所述的方法，其中所述报道子包含至少两种相同或至少两种不同的可检测物质。

10.根据权利要求9或10所述的方法，其中所述可检测物质选自：荧光标记、发光标记、生物发光标记、放射性标记或显色标记、酶、酶的底物、半抗原或特异性结合对的成分。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述报道子是小分子。

12.根据权利要求12所述的方法，其中所述小分子选自：荧光或显色物质、半抗原、特异性结合对的成分或酶的底物。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶位点包含生物标志。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述介质包含过氧化物化合物。

15.一种具有下式的化合物：

(R1)n-(X)q-R2(m)，

其中

R1和R2为过氧化物酶的底物的部分，

X为连接基团，以及

m、n和q为1至10的整数。

16.根据权利要求16所述的化合物，其中

R1和R2为阿魏酸的部分，

X为具有下式的连接基团：

其中R3和R4为氨基酸赖氨酸的残基，和

m和n为2至10的整数，

以及q为1至10的整数。

17.一种水缓冲化介质，包含：

(i)能够在存在过氧化物酶活性的条件下使至少两种报道分子交联的化合物，其中所述化合物为包含至少两个过氧化物酶的底物部分的分子，并且其中所述两种报道分子为可检测分子，以及

(ii)过氧化物化合物，

所述介质的pH为约4至约9。

18.根据权利要求17所述的介质，其中所述能够在存在过氧化物酶活性的条件下使至少两种报道分子交联的化合物为具有下式的分子：

(R1)n-(X)q-R2(m)，

其中

R1和R2为过氧化物酶的底物的部分，

X为连接基团或化学键，以及

m、n和q为1至10的整数。

19.根据权利要求18所述的介质，其中所述化合物为二氨基联苯胺。

20.根据权利要求18所述的介质，其中所述化合物为权利要求15或16中所限定的化合物。