[发明专利]外周血白细胞中FC受体介导的肿瘤坏死因子超家族mRNA表达

说明书

相关申请的交叉引用

本申请是2007年11月14日提交的美国临时专利申请号61/002,967的非临时专利申请，并且是2008年10月7日提交的美国专利申请号12/296,423的部分继续申请，其中所述美国专利申请号12/296,423是2007年4月5日提交的国际申请号PCT/US2007/008559的国家阶段，所述国际申请又要求2006年4月7日提交的美国临时专利申请号60/790,511的优先权。

发明背景

技术领域

本公开涉及用于预测患者对涉及肿瘤坏死因子超家族成员或细胞因子的类风湿性关节炎疗法的应答性的方法，涉及监测这种疗法的有效性的方法，以及涉及用于筛选用于治疗类风湿性关节炎的化合物的方法。本公开也涉及用于监测类风湿性关节炎患者中疾病状态的方法。

相关技术的描述

自身免疫病以产生与宿主细胞反应的抗体或具有自身反应性的免疫效应T细胞为特征。经常在某些类型的自身免疫病中鉴定到自身抗体，如重症肌无力中的抗乙酰胆碱受体抗体和系统性红斑狼疮中的抗DNA抗体。然而，在许多类型的自身免疫病中见不到此类自身抗体。此外，在健康个体中经常检测到自身抗体，不过此类抗体不诱导自身免疫病。因而，除了自身抗体外，仍待鉴定的其它机制显然参与自身免疫病的发病机理。

一旦自身抗体与靶宿主细胞结合，则认为补体级联被激活以在靶细胞膜上形成导致宿主细胞死亡的C5-9攻膜复合物(见Esser，Toxicology 87，229(1994))。副产物趋化因子如C3a、C4a或C5a召集更多白细胞至损害处(见Hugli，Crit.Rev.Immunol.1，321(1981))，所召集的白细胞或在损害处的天然存在的白细胞通过Fc受体(“FcR”)识别结合抗体的细胞(免疫复合物)。一旦FcR被免疫复合物交联，则白细胞释放TNF-α(见Debets等，J.Immunol.141，1197(1988))，所述TNF-α与宿主细胞表面上存在的特异性受体结合并诱导细胞凋亡或细胞损伤(见Micheau等，Cell 114，181(2003))。激活的FcR也启动趋化性细胞因子释放以召集不同亚群的白细胞至损害处(见Chantry等人，Eur.J.Immunol 19，189(1989))。这是FcR相关性自身免疫病的分子机制的总体假设。

类风湿性关节炎(“RA”)是涉及胃肠道炎症的免疫疾病。虽然该疾病在临床上被充分表征，然而对其发病机理了解甚少。RA以持续的炎性滑膜炎为特征，通常涉及对称分布的外周关节。这可以导致软骨破坏、骨糜烂和关节完整性的改变。RA的病因仍未知，不过高度怀疑CD4⁺T细胞在本病中发挥作用，原因是这种细胞在滑膜中占优势、RA患者的血液和血清中(由激活的T细胞产生的)可溶性IL-2受体增加以及本病通过除去T-细胞而明显改善。RA与关节中TNF-α(也称作TNFSF-2)的堆积有关。TNF-α通常起到动员白细胞以对抗感染和其它入侵者，从而在患部(affected area)引起炎症的作用。健康身体自身可以去除过多的TNF-α，但是类风湿性关节炎患者的身体不能。因而，越来越多的白细胞迁移至患部。尤其在类风湿性关节中，TNF-α的堆积引起炎症、疼痛和组织损伤。

已知IgG Fc受体(FcγR)与免疫复合物(IC)(一个表位与针对该表位的抗体的组合)反应引发各种炎症反应。经常在RA患者的关节损害处鉴定到IC，尽管具体抗原没有得到充分表征。也已知IC激活补体级联以形成炎症以及通过结合至各种白细胞的FcγR以形成抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。先前已经从滑膜液中收集并研究了局部浸润性白细胞。然而，因为这些收集物含有新来细胞和衰竭细胞，故而结果难以解释。由于移行至疾病部位时，外周血白细胞在RA的发病机理中发挥重要作用，因而已经开展众多实验以体外模拟此类功能。一般地，将单核白细胞分离、悬浮于培养基中并在CO₂培养箱中与各种刺激物或效应细胞孵育。然而，实施测定法的条件并不接近生理条件，原因是缺少不同细胞群体之间的通讯、缺少来自红细胞的氧供应以及缺少与血浆蛋白和其它组分的复杂相互作用。次级反应可能在冗长的孵育期间出现。此外，因繁琐的技术和巨大的实验对实验的变化，这些体外试验较少应用于诊断检验中。