[发明专利]抗体制剂

说明书

本发明涉及抗CD20单克隆抗体制剂，制备所述制剂的方法和所述制剂的用途。

发明背景

CD20分子(也被称为B-淋巴细胞-限制性分化抗原或Bp35)是位于前B及成熟B淋巴细胞上的分子量大约为35kD的疏水性跨膜蛋白(Valentine等人(1989)J.Biol.Chem.264(19)：11282-11287和Einfield等人(1988)EMBO J.7(3)：711-717)。在超过90％的来自外周血或淋巴样器官的B细胞的表面上发现了CD20，其在早期前B细胞发育过程中被表达并且一直存在到浆细胞分化。CD20存在于正常B细胞以及恶性B细胞上。特别地，CD20表达于超过90％的B细胞非何杰金氏淋巴瘤(NHL)上(Anderson等人(1984)Blood 63(6)：1424-1433)，但是在造血干细胞、原-B细胞、正常浆细胞或其它正常组织上没有被发现(Tedder等人(1985)J，Immunol.135(2)：973-979)。

CD20蛋白质的85个氨基酸羧基末端区域位于细胞质内。该区域的长度与其它B细胞-特异性表面结构(如IgM、IgD和IgG重链)或者组织相容性I1类抗原α或β链形成对比，其分别具有3、3、28、15和16个氨基酸的相对短的细胞质内区域(Komaromy等人(1983)NAR11：6775-6785)。在最后61个羧基末端氨基酸中，21个是酸性残基，而只有2个是碱性的，表明该区域具有强的净负电荷。GenBank登记号是NP-690605。认为CD20可能参与调节B细胞激活和分化过程中的早期阶段(Tedder等人(1986)Eur.J.Immunol.2516：881-887)并能起到钙离子通道的作用(Tedder等人(1990)J.Cell.Biochem.14D：195)。

存在两种不同类型的抗CD20抗体，它们的CD20结合模式和生物活性明显不同(Cragg，M.S.，等人，Blood，103(2004)2738-2743和Cragg，M.S.，等人，Blood，101(2003)1045-1051)。I型抗体，如利妥昔单抗(Rituximab)，在补体介导的细胞毒性方面是有效的，而II型抗体，如托西莫单抗(Tositumomab)(B1)、11B8和AT80，通过具有伴随的磷脂酰丝氨酸外露的胱天蛋白酶-非依赖性细胞凋亡促使靶细胞死亡。

I型和II型抗CD20抗体的共享的共同特征总结于表1中。

  I型抗CD20抗体  II型抗CD20抗体  I型CD20表位  II型CD20表位  使CD20定位于脂膜筏中  不使CD20定位于脂膜筏中  增加的CDC(如果是IgG1同种  型)  减少的CDC(如果是IgG1同种  型)  ADCC活性(如果是IgG1同种型)  ADCC活性(如果是IgG1同种型)  完全的结合能力  降低的结合能力