[发明专利]与动物毛发选择性结合的抗体和用于动物的基于抗体的药物递送系统

说明书

本发明提供与动物毛发选择性结合的抗体和其中可将特定制剂引导(directed to)至动物毛发的基于抗体的药物递送系统。这是由以下需求驱动的：增加动物的外寄生物治疗的有效治疗时期、降低这些药物的毒性并改进其释放概况(profile)。

选择两种单克隆抗体，其对犬的毛发表面显示出高度结合性。重要的是，没有检测到对人、马或猫的毛发的结合。本文呈现的数据证明，所选的抗体适合于设计将药物引导至动物毛发的递送系统。

背景技术

在很久以前本领域技术人员已经知道抗体与毛发结构的附着(attachment)或连接以及那些抗体在与毛发治疗活性物质或含有毛发治疗活性物质的颗粒连接中的有益用途。Widder(美国专利3,987,161)描述了包含抗体的毛发护理产品，所述抗体含有从动物获得的血清，所述动物在其身体被注射哺乳动物(优选人)毛发的水性悬浮液时能够在血液中形成抗体。Igarashi等人(美国专利5,597,386)描述了携带毛发染料或含有着色物质的聚合物颗粒(例如聚苯乙烯颗粒)的抗毛发抗体，因此使着色活性物质与人的毛发结合，以便获得毛发治疗中的益处。该抗体被描述为抗角蛋白抗体，其是通过向哺乳动物肌肉内注射角蛋白聚合物并通过牛初乳收获抗体而获得的，其中通过人毛发结构的水解和分解而获得角蛋白。携带染料的颗粒被描述为大分子载体。Koyama等人(美国专利6,123,934)描述了含有与毛发结合的抗体的化妆品组合物以及使用该抗体将乙烯基单体的聚合物或共聚物的胶乳颗粒与毛发结构连接。制剂可以含有阳离子聚合物或其它成分，以改善或修复毛发结构。在该发明中，通过注射水解的人毛发或人毛发颗粒(通过将完整的毛发纤维结构磨碎而得到)来免疫家禽，从而获得抗体。在所有这些发明中，使用人的毛发结构进行免疫，并获得与角蛋白结合的多克隆抗体。一般来讲，已经知道可以通过用生物抗原结构来免疫哺乳动物或鸟类以产生抗体，然后可将抗体用于将与那些抗体直接或间接连接的有益活性物质引导至需要的区域，例如癌细胞。

Paluzzi和合作者(2004)已经使用来自羊绒(cashmere)的II型角蛋白作为抗原来产生物种特异性的单克隆抗体。通过二维免疫印迹测试所选择抗体与分离自羊绒和羊毛的角蛋白的免疫反应性。检测到几个定量和定性差异，这使得在与其它动物纤维比较时，能够特异性地鉴别羊绒。但是，所选则的单克隆抗体与所有样品结合，在所测试物种之间仅观察到信号强度和蛋白模式上的微小差异。重要的是，抗体与所提取的角蛋白I型和II型蛋白结合——没有证明其与毛发表面结合。

在兽医领域，人们可以通过使用含有有益试剂的颗粒而从那些发明中获益，并且通过使用与动物毛发或动物皮肤结合的抗体将那些试剂靶向毛发角蛋白结构或皮肤结构。当人们考虑选择使用这些颗粒作为在延长的时期内(即几周、一个月甚至一年)释放那些药物的物体，这是特别有用的，从而保护动物抵抗有害动物(即，昆虫例如蚤和蜱)，或者利用其它有益效应，例如抵制有害昆虫或在这个长时期内治疗皮肤疾病。按一次性施用制备为此目的而设计的典型制剂，其显示出几个小时至大约四周的有益效应。使用载体系统(例如聚合物颗粒)可以提供显著延长这个时期的选择。使用抗体将那些颗粒与毛发连接可以提供一个选择，以提供活性物质与毛发的连接，该连接持续足够长的时间以允许药物载体在需要的时期内与毛发或皮肤结合(stick)。需要合适的制剂。可用于将那些制剂应用至动物的应用系统是：例如，喷雾剂或所谓的点式(spot-on)或擦式(wipe-on)制剂，其使制剂与动物皮肤或毛皮接触。感兴趣的活性物质可以是例如拟除虫菊酯或一般性杀虫剂，以及全身性药物或行为调节药剂。

以上专利中描述的方法可提供获得此类药物递送系统的途径。但是，由于那些发明中描述的抗体以及通过所描述的方法所获得的抗体与毛发角蛋白结构结合，因此出现一个主要的缺点：不论是何种物种，经由喷雾剂或点式制剂将制剂施用于动物时，会产生强烈且持久的与哺乳动物毛发(即角蛋白结构)的结合。因此，人类施用者也可能由于那些携带药物的系统与体毛或头发偶然结合而接受活性物质的剂量。同样，有可能由于抚摸动物而使那些携带药物的活性物质转移至人体，这有时可能会使宠物主人暴露于有侵袭性的活性物质，例如拟除虫菊酯。为了施用安全原因，如果人们可以获得允许选择性靶向某些动物物种的毛发或皮肤的抗体，则将是一个大的优点。如果兽医必需在畜舍(多个物种饲养于其中，并且只有一个物种表现待治疗的疾病，或者仅必需保护一个物种免遭物种特异性害虫(侵害))中使用那些制剂，则获得此类抗体制剂也具有相当大的优点。