[发明专利]新型小麦变应原

说明书

发明领域

本发明涉及IgE-介导的变态反应的领域，特别是职业性哮喘如面包师哮喘(baker′s asthma)。本发明更具体地是涉及对新型小麦变应原的鉴定以及其在治疗和诊断中的用途。本发明也涉及用于在哺乳动物中对IgE-介导的变态反应进行诊断和治疗的方法。

发明背景

来自小麦(普通小麦(Triticum aestivum))的变应原可引起三种不同的IgE-介导的变态反应，由吸入小麦面粉而引起的呼吸道变态反应，由摄食小麦制品而引起的食物变态反应以及属于禾本花粉(grass pollen)变态反应群组的小麦花粉变态反应。对小麦面粉成分的变态反应性致敏是引起职业性哮喘的最常见的原因之一，大约1-10％的烤面包工人受到影响，因此其被称作面包师哮喘。这些烤面包工人产生针对小麦面粉变应原以及面粉诱导的哮喘和/或鼻炎的IgE抗体。对于面包师哮喘是真正的职业性疾病这一假设的支持来源于如下发现，对于烤面包相关的变应原的致敏在暴露于面粉的人中的流行程度，与作为对照的未暴露于面粉的人群相比高十倍。另外，对于已知的可在敏感人群中引起支气管哮喘的小麦面粉的阈值的建立也是有可能的。最早的对面粉变态反应的系统性的研究已在1993年由Baggoe所进行。其它早期的报道集中于对面包师哮喘病例的描述以及随后的机理性研究，所述机理性研究证明了IgE介导的机制在面包师哮喘中的重要性。其后又有多次尝试通过免疫化学方法、RAST技术、免疫印迹以及近来通过分子克隆技术来鉴别引发疾病的面粉变应原。

普通小麦是禾本科的重要成员。高达40％的所有的变态反应的个体携有可与禾本花粉变应原反应的血清IgE抗体。多个研究曾报道了由于小麦面粉和禾本花粉蛋白中共有的IgE表位而造成的小麦面粉和禾本花粉之间的交叉反应性。禾本花粉变应原与小麦种子变应原之间的交叉反应性也曾有描述，并且有证据表明，患有面包师哮喘和IgE介导的对小麦的食物变态反应的患者可以识别不同的变应原，所述变应原可用于面包师哮喘、对小麦的食物变态反应以及禾本花粉变态反应的差别诊断。然而，绝大多数可溶的小麦面粉变应原仍未经鉴定。如今，只有少数几个小麦面粉变应原已经过鉴定和鉴别，并且其包括α淀粉酶抑制剂家族成员、酰基辅酶A氧化酶、过氧化物酶、果糖二磷酸缩醛酶以及最近的硫氧还蛋白。

基于小麦面粉提取物的诊断并不能区分患有对小麦的呼吸道变态反应或者食物变态反应的患者。因此，对于针对小麦的呼吸道变态反应的情况，精确的诊断仍旧依赖于具体的吸入激发(challenge)，而对于疑似的食物变态反应，精确的诊断则依赖于双盲的、安慰剂对照的食物激发(DBPCFC)，并且如下问题还未解决，即是否可能鉴定出变应原，其可用于选择性的诊断和治疗各种由小麦诱导的变态反应的表现形式，比如面包师哮喘、食物变态反应以及花粉病。因此有需要鉴定出新型变应原并建立方法和诊断性测试来具体地鉴定出患有IgE-介导的变态反应的患者，比如呼吸道变态反应如面包师哮喘患者，从而将其与患有食物变态反应和/或花粉变态反应的患者区分开。此外也需要使用此类小麦变应原来用于治疗IgE-介导的变态反应。本发明通过提供新型的小麦变应原及其在治疗和诊断中的用途来达成这些需要。此外本发明提供了已知的肽和蛋白在治疗和诊断中的用途。这些肽中的一些由如下处得知：Gennaro S.D.et al，Biological Chemistry，April2005，386：383-389；UNIPROT编号P82977；UNIPROT编号Q6W8Q2；US7,214,786和US2006/0107345。

发明概述

如上所述，几个已经被鉴定鉴别出来的小麦面粉变应原包括α淀粉酶抑制剂家族的成员、酰基辅酶A氧化酶、过氧化物酶、果糖二磷酸缩醛酶以及硫氧还蛋白。迄今为止还没有已经鉴定出的变应原可用于选择性的诊断和治疗各种由小麦诱导的变态反应的表现形式，比如面包师哮喘、食物变态反应以及花粉病。这引领本发明人去寻找另外的、仍未鉴定出来的小麦变应原。

本发明通过提供新型的小麦变应原以及用于在哺乳动物中对IgE-介导的变态反应进行诊断和治疗的方法，至少满足了部分现有技术的需要。

在第一个方面，本发明涉及代表新型小麦变应原的分离自小麦或者重组性地产生的多肽，以及其片段或变体，所述片段或变体共享有抗体所针对的表位。所述分离的多肽包含克隆#10、#112或#126的氨基酸序列。

在第二个方面，本发明涉及编码本发明多肽的核酸，所述核酸具有克隆#10、#112或#126的核苷酸序列。