[发明专利]经修饰葡萄糖脱氢酶基因

权利要求书

1.经修饰葡萄糖脱氢酶(GLD)，其

●在SEQ ID NO：1所示的野生型FAD缀合型葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列中包含选自下列位的氨基酸的至少1个氨基酸残基的置换：37、69、72、73、76、78、102、217、228、240、356、407、424、437、527和530位的氨基酸；且

●木糖作用性/葡萄糖作用性相比野生型GLD降低。

2.权利要求1的经修饰葡萄糖脱氢酶，其中所述木糖作用性/葡萄糖作用性相比野生型GLD降低至0.85倍以下。

3.权利要求1或2的经修饰葡萄糖脱氢酶，其中氨基酸置换选自：

●D72A、G73D、G73A、G73S、G73C、G73Q、G73W、G73Y、G73E、G73H、R102H、Y228H、V356A及P527L；且

●S37V、S37G、T69I、L76F、F78L、R102V、N217S、P240I、P240L、Q407A、Q407S、Y424S、A437I及T530A。

4.经修饰葡萄糖脱氢酶，其在SEQ ID NO：1所示的野生型FAD缀合型葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列中具有选自下列的氨基酸置换：

●N64D+R102H+L250Q、G73D、Y228H+A589T、K374Q+P527L、V356A、D72A+G210S、G73A、P527L、D72A、Y228H、G73C、G73H、R102H、D72A+G73D、G73S、G73Q、G73W、G73Y及G73E；且

●S37V、S37G、T69I、L76F、F78L、R102V、N217S、P240I、P240L、Q407A、Q407S、Y424S、A437I及T530A。

5.多核苷酸，其编码权利要求1～4中任一项的经修饰葡萄糖脱氢酶。

6.权利要求5的多核苷酸，编码SEQ ID NO：1所示的野生型FAD缀合型葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列的多核苷酸具有SEQ ID NO：2所示的碱基序列。

7.重组载体，其具有权利要求5或6的多核苷酸。

8.经转化细胞，其通过用权利要求7的重组载体来制备。

9.权利要求8的经转化细胞，其为大肠杆菌或米曲霉菌。

10.经修饰GLD的制备方法，其特征在于，培养权利要求8或9的经转化细胞，并从所得到的培养物收获经修饰GLD。

11.葡萄糖测定方法，其特征在于使用：

●权利要求1～4中任一项的经修饰GLD，或

●通过权利要求10的制备方法得到的经修饰GLD。

12.葡萄糖测定试剂组合物，其特征在于含：

●权利要求1～4中任一项的经修饰GLD，或

●通过权利要求10的制备方法得到的经修饰GLD。

13.葡萄糖测定用生物传感器，其特征在于使用：

●权利要求1～4中任一项的经修饰GLD，或

●通过权利要求10的制备方法得到的经修饰GLD。