[发明专利]检测DNA损伤的设备和方法无效
申请号: | 200880126456.5 | 申请日: | 2008-12-05 |
公开(公告)号: | CN101939106A | 公开(公告)日: | 2011-01-05 |
发明(设计)人: | N·托马斯;M·肯里克;S·斯塔布斯 | 申请(专利权)人: | 通用电气医疗集团英国有限公司 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;C12Q1/68;G01N27/447;G01N33/50 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 赵向辉;郭文洁 |
地址: | 英国白*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 dna 损伤 设备 方法 | ||
1.用于确定细胞中DNA损伤的设备,所述设备包括多孔板,所述板包括孔的阵列,所述孔彼此保持固定关系并且每个孔具有轴、侧壁和底,其中所述孔设置了布置在其中的电极对;并且其中提供了将所述电极对并联到外部电压供给的装置。
2.根据权利要求1所述的设备,其中所述底大体垂直于所述孔的轴。
3.根据权利要求1所述的设备,其中所述多孔板中孔的侧壁为不透明的。
4.根据权利要求1所述的设备,其中所述多孔板中每个孔的底为光学透明的。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的设备,其中所述多孔板的每个孔均安装了一个电极对。
6.根据权利要求5所述的设备,所述多孔板包括板盖,所述板盖支撑用于将电泳电流施加到每个孔的电极和电连接装置。
7.根据权利要求5所述的设备,其中所述多孔板的底板包括延伸通过所述板的电极对阵列,并且其中每个电极对的布置使其配合在所述多孔板的单独的孔内。
8.根据权利要求6或权利要求7所述的设备,其中每个孔内的阳电极和阴电极彼此布置在相同的水平。
9.根据权利要求6或权利要求7所述的设备,其中每个孔内的阳电极和阴电极相对于所述孔的底布置在不同的平面上。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的设备,其中每个孔的所述底包括蚀刻到所述底中的微通道和/或凹点的阵列。
11.一种原位方法,用于通过利用根据权利要求1至10中任一项所述的设备来确定细胞中的DNA损伤,所述方法包括:
a)在存在流体培养基的情况下将待测细胞提供在所述设备的一个或多个孔中;
b)任选地将所述细胞暴露于测试试剂;
c)用固定化基质覆盖所述细胞;
d)用细胞裂解和变性试剂处理所述细胞从而提供包含变性细胞DNA的基质;
e)将所述变性细胞DNA与电泳溶液接触;
f)在造成DNA片段电泳分离的条件下对所述一个或多个孔中的电极施加电压;
g)将所述DNA片段与染色剂接触;和
h)使用检测手段以观察DNA片段的图案。
12.根据权利要求11所述的方法,其中所述检测包括将所述多孔板中的全部孔成像的成像手段。
13.根据权利要求11或12中任一项所述的方法,其中彗星测定用于确定细胞中的DNA损伤。
14.用于确定细胞中DNA损伤的设备的用途,所述设备包括多孔板,所述板包括孔的阵列,所述孔彼此保持固定关系并且每个孔具有轴、侧壁和底,其中所述孔设置了布置在其中的电极对;并且其中提供了将所述电极对并联到外部电压供给的装置。
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