[发明专利]通过酶促水解及随后的化学/酶促酯化生产生物柴油

权利要求书

1.生产生物柴油的方法，所述方法包括：

将甘油三酯酶促水解以形成脂肪酸和甘油；以及

用所述脂肪酸酯化低级醇以形成所述生物柴油。

2.如权利要求1所述的方法，其中将所述甘油三酯与脂酶混合，并在足够的温度下孵育足够的时间以形成所述脂肪酸。

3.如权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述甘油三酯选自植物油、动物脂、牛脂、润滑脂和再循环的提炼油或脂肪。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述脂肪酸为C₁₂至C₂₂脂肪酸。

5.如权利要求2-4中任一项所述的方法，其中所述脂酶来源于植物、细菌、真菌和更高等的真核生物。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述脂酶来源于细胞外或细胞内，或者为全细胞的形式。

7.如权利要求2-6中任一项所述的方法，其中所述脂酶是固定的。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述固定在多孔支持物或粉末上实现。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述多孔支持物为丙烯酸树脂。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述脂酶为南极假丝酵母(Candida antarctica)脂酶B。

11.如权利要求2-9中任一项所述的方法，其中所述脂酶来源于皱褶假丝酵母(Candida rugosa)。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述酶促水解反应在约20℃至约50℃的温度下孵育。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述酶促水解反应孵育时间为约0.5小时至约24小时。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述酶促水解反应在水的存在下进行。

15.如权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述酶促水解反应在缓冲溶液中进行。

16.如权利要求14所述的方法，其中水与甘油三酯的比例为约1∶10至约20∶1(v/v)。

17.如权利要求2-16中任一项所述的方法，其中所述脂酶浓度为约0.125mg/ml至约2mg/ml。

18.如权利要求2-17中任一项所述的方法，其中所述脂酶能够利用中空纤维膜或其他过滤器而再循环。

19.如权利要求14所述的方法，其中所述酶促水解反应还包含有机溶剂。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述有机溶剂选自C₅-C₁₂烷和空间位阻烷醇。

21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述酯化步骤是化学催化或酶促催化的。

22.如权利要求21所述的方法，其中所述脂肪酸的所述化学酯化包括：

将所述脂肪酸与所述醇和酸催化剂混合；以及

将混合物在足够的温度下孵育足够的时间以形成生物柴油。

23.如权利要求22所述的方法，其中所述醇为C₁-C₅醇。

24.如权利要求22所述的方法，其中所述酸催化剂选自无机酸催化剂或有机酸催化剂。

25.如权利要求24所述的方法，其中所述酸催化剂为液体或固体。

26.如权利要求22-25中任一项所述的方法，其中所述酸催化剂为酸性苯乙烯-二乙烯基苯磺化离子交换树脂。

27.如权利要求22-26所述的方法，其中将所述酸催化剂通过用极性溶剂洗涤而再生。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述极性溶剂选自C₁-C₆烷醇和空间位阻烷醇。

29.如权利要求21-28中任一项所述的方法，其中所述酯化步骤包含有机溶剂。