[发明专利]用于水产养殖的可口服给药的免疫刺激产品

权利要求书

1.可口服给药的免疫刺激产品，其至少包含微囊化的细胞因子和肠保护聚合物，其中所述细胞因子是鱼类细胞因子、或软体动物细胞因子或甲壳类动物细胞因子。

2.如权利要求1所述的免疫刺激产品，其中所述细胞因子是重组细胞因子。

3.如权利要求2所述的免疫刺激产品，其特征在于所述微囊化的重组细胞因子是肿瘤坏死因子α(TNFα)。

4.如权利要求2所述的免疫刺激产品，其特征在于所述微囊化的重组细胞因子在宿主微生物中过度表达，所述宿主微生物是酵母。

5.如权利要求4所述的免疫刺激产品，其特征在于所述酵母是巴斯德毕赤酵母(Pichia Pastoris)。

6.如权利要求1-5中任一项所述的免疫刺激产品，其特征在于所述细胞因子源自适于水产养殖的海洋生物，例如：金头鲷(Sparus aurata)、狼鲈(Dicentrarchus labrax)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、瘤棘鲆(Psetta maxima)、细点牙鲷(Dentex dentex)、尖吻重牙鲷(Diplodus puntazzo)、黑斑小鲷(Pagellus bogaraveo)、大西洋白姑鱼(Argyrosomus regius)、欧洲鳗鲡(Anguillaanguilla)、章鱼(Octopus sp.)。

7.如前述任一项权利要求所述的免疫刺激产品，其特征在于将所述产品饲喂给多细胞生物。

8.如权利要求7所述的免疫刺激产品，其中所述多细胞生物是卤虫(Artemia sp.)或轮形动物(phylum Rotifera)。

9.如前述任一项权利要求所述的免疫刺激产品，其特征在于用肠保护聚合物将所述细胞因子和/或所述包含所述重组细胞因子的宿主微生物微囊化。

10.制备如权利要求2所述的免疫刺激产品的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

-从鱼类、软体动物或甲壳类动物的组织中选择并分离编码所选细胞因子的cDNA，

-在至少一种用于在至少一种适合的宿主微生物中表达细胞因子的表达载体中克隆所述cDNA，

-培养所述宿主微生物的宿主细胞，获得重组细胞因子或包含所述重组细胞因子的宿主微生物培养物，

-将所述重组细胞因子或所述包含所述重组细胞因子的宿主微生物微囊化，获得微囊化的重组细胞因子或微囊化的包含所述重组细胞因子的宿主微生物。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于所述宿主微生物是选自巴斯德毕赤酵母、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的酵母。

12.如权利要求10或11所述的方法，其特征在于所述微囊化步骤是通过在肠保护聚合物的存在下经喷雾干燥实施雾化来进行的。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于所述肠保护聚合物选自：醋酸纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基纤维素邻苯二甲酸酯、羧甲基纤维素、甲基丙烯酸共聚物、麦芽糊精、壳聚糖、明胶、淀粉、阿拉伯胶。

14.如权利要求1-9中任一项所述的可口服给药的免疫刺激产品用于在水产养殖中免疫刺激鱼类、软体动物或甲壳类动物的用途。

15.如权利要求14所述的免疫刺激产品的用途，其中所述细胞因子源自所要免疫刺激的相同的鱼类、软体动物或甲壳类动物物种。

16.如权利要求14或15所述的用途，其中所述鱼类、软体动物或甲壳类动物选自：金头鲷、狼鲈、虹鳟、瘤棘鲆、细点牙鲷、尖吻重牙鲷、黑斑小鲷、大西洋白姑鱼、欧洲鳗鲡、章鱼。

17.如权利要求14-16所述的用途，其中所述免疫刺激是通过在饲喂期间将所述产品与食物共同给药来进行的。

18.如权利要求14-16所述的用途，其特征在于所述免疫刺激是通过以下步骤进行的：将所述免疫刺激产品向多细胞生物给药，获得富集的多细胞生物，并随后向所述物种饲喂所述富集的多细胞生物。

19.如权利要求18所述的用途，其中所述多细胞生物是卤虫或轮形动物。