[发明专利]应用真菌诱导龙血树产生血竭的方法有效
申请号: | 200910000257.6 | 申请日: | 2009-01-15 |
公开(公告)号: | CN101779578A | 公开(公告)日: | 2010-07-21 |
发明(设计)人: | 郭顺星;龚利娟;陈晓梅;王春兰;孟志霞 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药用植物研究所 |
主分类号: | A01G7/06 | 分类号: | A01G7/06;C12N1/14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 应用 真菌 诱导 龙血树 产生 血竭 方法 | ||
1.一种应用真菌诱导龙血树产生血竭的方法,包括步骤:
(1)真菌的培养
将由龙血树分离得到的保藏编号为CGMCC No.2598的真菌D-22自低温保藏的斜面试管菌种活化后,转接于PDA培养基的平皿中,恒温培养15-20天;或转接于PDA液体培养基中,恒温震荡培养5-15天,或转接于锯末麦麸固体培养基中,恒温培养20-50天;
将上述培养的菌种接种到锯末复合固体培养基中进行培养,待菌丝长满培养基后直接使用;锯末复合固体培养基含有锯末、树叶和麦麸,它们的重量比为2∶1∶0.5;或PDA平皿培养的菌种,在菌落边缘打孔成菌片,接入PDA液体培养基中,培养5-15天后取发酵物使用;
(2)真菌的培养特性
保藏编号为CGMCC No.2598的菌株D-22为镰孢属(Fusarium sp.)真菌,在PDA培养基上菌落为粉色,气生菌丝丝状,菌落背面为红褐色,分泌红褐色物质,生长1周菌落直径为5.2cm;小型分生孢子单胞,椭圆形,有时两端略弯曲,3.4-12.1×1.4-3.4μm;大型分生孢子,多胞,镰刀形,37.6×4.0μm,少见;
(3)真菌的接种
接种真菌的方法为:选取树龄5年以上的龙血树树干,通过钻孔或挖槽的方式在树干形成直径0.5-3cm,深2-15cm的接种孔或长1-6cm,宽1-6cm,深1-6cm的接种槽;在接种孔或接种槽中接入锯末复合固体培养基培养的菌种,或接入液体培养基培养的发酵物;接种后用聚丙烯薄膜包扎接菌孔或接种槽;
用上述方法在龙血树的树干上接种真菌一次,或在第一次接种真菌后,在接种孔周围形成血竭样红色物质的初期或中期,在原接种部位或在红色物质形成区域中,用上述方法重复接种真菌。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:该方法适用的树种为百合科龙血树属小花龙血树和剑叶龙血树。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:用于打孔或挖槽,接种真菌D-22的龙血树树干为树龄5年以上的活体龙血树树干或树龄5年以上的离体龙血树树干。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在树干挖接种槽的方式包括横向切割形成凹槽,纵向切割形成凹槽,或从上向下斜向形成凹槽。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:龙血树树干上接种孔或接种槽的间隔是纵向间隔5-15cm,横向间隔3-10cm。
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