[发明专利]一种龙血竭药材的质量控制方法

权利要求书

1.一种龙血竭药材的质量检测方法，其特征在于采用以下方法中的任意一种或几种：

(1)采用紫外-可见分光光度法检测，龙血竭药材中含总酚以7，4′-二羟基黄酮计不得少 于30.0％，检测步骤如下：

a.对照品溶液的制备：取7，4′-二羟基黄酮，加无水乙醇制成对照品溶液；

b.标准曲线的制备：量取不同剂量的对照品溶液，加无水乙醇，加十二烷基磺酸钠溶液， 铁氰化钾溶液，三氯化铁溶液，摇匀，再加盐酸定容；照紫外-可见分光光度法，测定吸收度， 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

c.供试品溶液制备与测定法：取龙血竭药材，加无水乙醇溶解；取聚酰胺，加入上述溶 液10ml，挥干乙醇，装入层析柱，用10～30％的乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用无水乙醇洗脱， 收集洗脱液并定容；量取该溶液置棕色量瓶中，加无水乙醇定容，量取该溶液置棕色量瓶中， 加十二烷基磺酸钠溶液，铁氰化钾溶液，三氯化铁溶液，再加盐酸定容，摇匀，得供试品溶 液；照紫外-可见分光光度法，测定吸光度，从标准曲线上读取含量，计算，即得；

(2)采用高效液相色谱法检测，龙血竭药材中含7，4′-二羟基黄酮不得少于0.20％，检测 步骤如下：

a.色谱条件和系统适用性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸溶液为 流动相；

b.对照品溶液制备：称取7，4′-二羟基黄酮对照品适量，加甲醇制成对照品溶液；

c.供试品溶液制备：取龙血竭药材，研细，称定，置量瓶中，加甲醇稀释至刻度，吸取 该甲醇溶液，在硅胶G薄层板上，点供试样品溶液和对照品溶液，以氯仿-甲醇溶液为展开剂 展开，取出，晾干，置紫外灯下观察荧光，并与对照品荧光斑点对照，标记供试品与对照品 相应位置的色斑；按标记刮取色斑，置量瓶中，加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷，加 甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，收集续滤液，即得供试品溶液；

d.测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得；

(3)采用高效液相色谱法检测，龙血竭药材中含龙血素B不得少于0.40％，检测步骤 如下：

a.色谱条件和系统适用性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸水溶液；

b.对照品溶液的制备：称取龙血素B对照品，加甲醇制成对照品溶液；

c.供试品溶液的制备：取龙血竭药材，研细，称定，置烧瓶中，加乙醚，加热回流，滤 过，挥干乙醚，残渣加甲醇溶解并定容，摇匀，再精密吸取少量至量瓶中，用甲醇稀释定容， 摇匀，滤过，即得供试品溶液；

d.测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得；

(4)采用高效液相色谱指纹图谱检测，其标准指纹图谱有9个共有峰，各共有峰的相对 保留时间分别为1号峰0.40～0.60，2号峰0.45～0.65，3号峰0.55～0.75，4号峰0.60～0.80， 5号峰0.70～0.90，6号峰0.71～0.95，7号峰0.90～1.10，S号峰1.00，8号峰1.01～1.25， 其中S号峰为龙血素B的色谱峰，检测步骤如下：

a.色谱条件与系统适应性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为A：0.1％的磷 酸与B：乙腈，梯度洗脱；

b.参照物溶液的制备：取龙血素B对照品，加甲醇制成参照物溶液；

c.供试品溶液的制备：取龙血竭药材，研细，加入甲醇，超声处理，滤过，取续滤液， 滤过，即得供试品溶液；

d.测定法：精密吸取参照物溶液与供试品溶液，分别注入液相色谱仪，测定，即得。