[发明专利]细胞修饰方法和细胞修饰设备

权利要求书

1、用于在人或哺乳动物体外修饰人或哺乳动物免疫细胞、尤其是效应细胞的细胞修饰方法，

其中在第一步骤中，将至少一种经包封的物质、优选活性药物成分引入分离的人或哺乳动物免疫细胞中和/或置于其上，和

其中在引入所述至少一种物质之前或之后的第二步骤中，增强所分离免疫细胞的细胞毒性效应器功能和/或靶向能力，优选增强所述分离的免疫细胞的靶标找寻能力。

2、根据权利要求1的细胞修饰方法，其特征在于：

为了增强细胞毒性效应器功能和/或靶向能力，在所述第二步骤中向所述分离的免疫细胞的基因组中引入来自肿瘤相关抗原(TAA)特异性免疫细胞尤其是TAA特异性T细胞的至少一种免疫细胞受体基因，尤其是T细胞受体基因(TCR基因)，其中优选地，所述至少一种免疫细胞受体基因是通过基因转移引入的。

3、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

为了增强细胞毒性效应器功能和/或靶向能力，在所述第二步骤中向所述分离的免疫细胞提供经遗传修饰的或嵌合的免疫细胞受体，其中优选地，所述分离的免疫细胞是细胞毒T淋巴细胞(CTL)或自然杀伤细胞(NK细胞)，

其中优选地，所述嵌合免疫细胞受体是嵌合免疫球蛋白T细胞受体，和/或其中优选通过基因转移向所述分离的免疫细胞提供经遗传修饰的或嵌合的免疫细胞受体。

4、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

为了增强细胞毒性效应器功能和/或靶向能力，在所述第二步骤中将所述分离的免疫细胞与至少一种抗体和/或其至少一种片段组合，优选与至少一种双特异性抗体、三特异性抗体、双抗体、三抗体和/或四抗体和/或其片段组合，其中优选地，所述至少一种抗体和/或其片段被引入所述分离的免疫细胞中和/或置于其上，

和/或其中优选地，所述分离的免疫细胞是单克隆T细胞或多克隆T细胞，优选活化的多克隆T细胞。

5、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

为了增强细胞毒性效应器功能和/或靶向能力，在所述第二步骤中选择下列特定类型的分离免疫细胞作为所述分离的免疫细胞：T细胞，尤其是肿瘤抗原特异性T淋巴细胞，

和/或

其中所述分离的免疫细胞是自体细胞、同种异体细胞或前体细胞、终末分化的效应细胞、T细胞、细胞毒T细胞尤其是活化的细胞毒T细胞、TALL-104细胞、C CURE 709细胞和/或细胞毒T淋巴细胞、肿瘤抗原特异性T淋巴细胞、NK细胞尤其是NK-92细胞、单核细胞和/或巨噬细胞尤其是单核细胞来源的巨噬细胞。

6、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

在引入和/或安置所述至少一种经包封的物质之前扩增所述分离的免疫细胞。

7、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

至少一种所述经包封的物质用于治疗，其包括细胞抑制药物和/或血管发生抑制剂和/或基于抗体的治疗剂和/或治疗性DNA和/或基于RNAi的治疗剂，

和/或

至少一种所述经包封的物质用于诊断，包括金属性纳米颗粒尤其是铁氧体纳米颗粒，即平均直径约数十纳米至约数微米的颗粒。

8、根据任一项前述权利要求的细胞修饰方法，其特征在于：

在所述第二步骤中，孵育所分离的免疫细胞，优选孵育约5分钟至约2小时，以引入和/或安置所述至少一种经包封的物质，和/或以进行用于增强所述分离的免疫细胞的效应器功能的引入和/或安置，

和/或

其中所述至少一种经包封的物质通过电穿孔和/或转染引入所述分离的免疫细胞和/或安置于其上，和/或其中所述第二步骤中用于增强所述分离的免疫细胞的效应器功能的引入和/或安置通过电穿孔和/或转染来进行，

和/或

其中所述至少一种物质被包封，以使该物质在约1天至25天之后释放。