[发明专利]细胞修饰方法和细胞修饰设备

说明书

技术领域

本发明涉及细胞修饰方法和细胞修饰设备，其修饰人或动物血液的细胞组分，尤其是机体天然免疫防御机制的细胞(例如T细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞或小胶质细胞)，以使所述细胞在引入人或动物体内尤其是哺乳动物体内后发挥治疗作用，例如抗癌症(如肺或胰或卵巢、乳腺或脑的癌症)或者抗其它疾病，或者发挥诊断作用。本发明还涉及经相应修饰的免疫细胞。

背景技术

很久以来，人们就了解通过活性成分进行医学治疗的方法。在这些方法中，经常将活性成分递送到人或动物的全身。例如，可经口或通过注射施用活性成分；然后所述活性成分使其自身均匀分布在人或动物体的整个机体中。可见，之前治疗方法的决定性缺点在于人或动物机体中未患病的区域也可受到活性成分的影响，并且仅有一小部分活性成分可在靶区域中发挥作用。因此，相应的高活性成分剂量是可以避免的。

发明内容

本发明的主要目的是使用免疫细胞作为活性物质或药剂(例如药物、RNAi等)和/或诊断剂的靶向性运载体。为了改善靶向性自主运载(即对疾病组织的靶向)，使用了再靶向(retargeting)策略，例如双特异性抗体，与TCR相关的遗传转化细胞等。由于其作为活的运载体使用，免疫细胞导向转移处(例如肿瘤)，并首先发挥内在的细胞毒性功能。然后释放药剂或活性物质以进行强化。所述释放由特定的在内部或外部施加的物理或生理因素(例如pH、温度)触发，或者以时间依赖性方式释放，例如通过如细胞质或溶酶体/内体中的酶或通过pH造成颗粒/物质或外壳降解来导致释放。药剂或活性物质提高了免疫细胞的天然作用(内在的细胞裂解/细胞毒性特征)。

此处和以下章节中，所述的细胞组分也简称为细胞。所述细胞还可包括例如人或动物体内其它的已分化天然细胞，或者未分化细胞，例如干细胞。其后作为药物引入哺乳动物体内的经修饰细胞的治疗作用可包括例如受控的活性成分释放或组织再生等等。

如此修饰细胞的治疗作用可包括：

-释放药剂或活性物质，例如细胞抑制药物和/或血管发生抑制剂，

-释放基于抗体的治疗剂，

-释放用于转染的治疗性DNA，

-释放基于RNAi的治疗剂，其选择性地靶向致病的基因和病毒；和/或

-释放趋化因子，例如细胞因子或蛋白质肽或糖蛋白，即促进免疫系统的其他细胞或造成凋亡的调节剂，例如TNFα；

或者，就诊断目的而言：

-使细胞负载造影剂，例如铁磁颗粒(例如用于NMR诊断)。

治疗或诊断剂还可一起使用，例如在免疫细胞中组合，或者通过应用载有治疗剂或诊断剂的免疫细胞级分来进行。

因此，本发明的任务是开发这样的方法和设备，其允许修饰人或动物细胞，以使这些细胞在重新引入人或动物体时被递送到主动靶向的期望机体部分或细胞，并在那里发挥治疗或诊断作用。通过以这种方式修饰动物或人细胞，有可能例如以靶向方式用低剂量对抗疾病，或者以靶向方式增强或强化组织，而不影响机体中未患病的区域，和/或检测机体中的患病部位，例如肿瘤和转移的部位。

本发明的目的通过权利要求1的方法、权利要求10的经修饰免疫细胞以及权利要求13的装置来实现。在从属权利要求中描述了有利的实施方案。本发明的用途描述于权利要求14和15中。

本发明对上述问题所提供的解决方案的基本方面是提供细胞修饰方法，其中在第一步骤中，将一种经包封的物质(或多于一种经包封的物质)(优选活性药物成分)引入分离的人或动物免疫细胞中和/或置于其上；以及其中在引入所述至少一种经包封的物质之前或之后的第二步骤中，增强所述分离的免疫细胞的细胞毒性效应器(cytotoxic effector)的功能和/或分别增强所述分离的免疫细胞的靶向能力或靶标寻找能力。

所包封的物质可引入细胞中；但是，也可以将此物质置于、连接或粘附于细胞的外表面。后者可例如借助静电相互作用技术、借助模印所包封物质表面的(例如双特异性、单特异性或三特异性的)抗体或分子(以允许将所述物质置于或固定在细胞表面)来实现。