[发明专利]一种使孢子快速萌发的方法

权利要求书

1.一种使孢子快速萌发的方法，包括以下步骤：

A、取孢子菌株在PDA培养基上置于培养箱内进行单孢培养，待菌丝长满皿后，置于光照下连续照射至少4天，诱导孢子的产生；

B、用适当量的无菌水冲洗菌落表面，得到孢子液，孢子液经过过滤得到孢子悬浮液，然后用无菌水稀释，使孢子浓度达到10⁵个/ml；

C、取配置好的孢子悬浮液进行悬滴法和载玻片萌发法操作；

D、把从步骤B得到的部分孢子悬浮液离心，保留部分上清约，备用；

E、无菌条件下，把灭过菌的孔径为0.45um的透明微孔滤膜平铺在事先准备好的PDA平板上，使膜与培养基表面紧密接触，不留空隙；

F、取步骤D离心得到的孢子悬浮液平铺到滤膜上，用三角玻棒摊匀，用封口膜封口后置于28℃培养箱培养。

2.根据权利要求1所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，还包括步骤G、在显微镜下直接观察孢子的萌发率。

3.根据权利要求1所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，还包括步骤G、用无菌水冲洗萌发的孢子，得到萌发的孢子悬浮液，观察孢子悬浮液得到萌发率。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，保留部分上清约100ul。

5.根据权利要求1-3任意一项所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，培养箱的温度28±0.5℃。

6.根据权利要求1-3任意一项所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，光照的温度控制在28±0.5℃范围内。

7.根据权利要求1所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，步骤C采用的悬滴法和载玻片萌发法参照方中达《植病研究方法》。

8.根据权利要求1所述的一种使孢子快速萌发的方法，其特征在于，步骤E中，膜的大小以刚能全部遮住培养基为准。