[发明专利]一种组织工程用海藻酸钠的制备方法

权利要求书

1.一种组织工程用海藻酸钠的制备方法，其特征在于：以市售食品级海藻酸钠为原料，经活性炭吸附并形成凝胶，此凝胶分别经酸性溶液和碱性溶液浸泡，再经鳌合剂溶解并过滤与透析，最后在无菌环境下，用有机溶液将海藻酸钠析出并冷冻干燥。通过上述过程去除海藻酸钠中杂蛋白、内毒素等杂质，获得组织工程用海藻酸钠。

2.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于：原料食品级海藻酸钠经活性炭吸附并形成凝胶的具体操作过程为，

1)将原料市售食品级海藻酸钠NaALG溶解在蒸馏水中，其w/v浓度为0.1～4％，加入活性炭，海藻酸钠与活性炭的重量比为20∶1～1∶1，室温条件下机械搅拌0.5～20小时，将溶液经膜过滤去除固体杂质，得海藻酸钠溶液；

2)将海藻酸钠溶液滴加到过量的二价金属Ba²⁺或Ca²⁺盐溶液中形成凝胶微球，经0.5～1小时聚合过程后，取出凝胶微球，用蒸馏水充分洗涤凝胶微球。

3.根据权利要求书2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中过滤膜的孔径为0.8μm的硝酸纤维素膜；步骤2)中二价金属盐溶液为Ba²⁺或Ca²⁺的盐溶液，浓度为50mM～100mM。

4.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于：所述凝胶微球分别经酸性溶液和碱性溶液浸泡的具体操作过程为，

1)将海藻酸盐凝胶微球置于pH 2.0～4.0、0.5M～3M酸性溶液中浸泡5～24小时，取出凝胶微球用蒸馏水充分洗涤；

2)将步骤1)中得到的凝胶微球转移至pH 8.0～9.0、55mM～800mM的碱性溶液中浸泡2～12小时，然后将凝胶微球取出，再次用蒸馏水充分洗涤。

5.根据权利要求书4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中酸性溶液为盐酸溶液、醋酸溶液、或它们二者任意比混合酸溶液；所述步骤2)中碱性溶液为柠檬酸钠溶液、磷酸钠盐溶液、或它们二者任意比混合溶液。

6.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于：凝胶再经鳌合剂溶解并过滤与透析的具体操作过程为，

1)将经酸性溶液、碱性溶液浸泡后的凝胶微球溶解到pH 10.0～12.0、55mM～500mM的螯合盐溶液中，溶液经膜过滤；

2)将步骤1)中得到的溶液再透析20～30小时，得到海藻酸钠溶液。

7.根据权利要求书6所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中螯合盐溶液为EDTA、EGTA、或者它们二者任意比混合液；凝胶体积与螯合盐溶液体积比＝1∶1～1∶5；所述步骤2)膜过滤为分别经孔径为0.45μm和0.22μm硝酸纤维素膜过滤溶液；所述透析膜截流分子量12～14kDa。

8.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于：在无菌环境下，用有机溶液将海藻酸钠析出并冷冻干燥的具体操作过程为，将被透析膜截留的NaALG溶液缓慢倒入有机溶液中形成絮状沉淀，沉淀经冷冻干燥获得组织工程用海藻酸钠。所述有机溶液为C1～C3的醇、醚、酮或它们的任意比混合物，NaALG溶液与有机溶液体积比＝1∶2～1∶10。