[发明专利]一种沙丁胺醇人工抗原及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种沙丁胺醇人工抗原，其特征在于它由沙丁胺醇与载体蛋白偶联构成，结构式为：

式中载体蛋白protein为牛血清蛋白或者卵清蛋白，n为整数1～15。

2.权利要求1所述沙丁胺醇人工抗原的制备方法，其特征在于首先将沙丁胺醇与活化对氨基本甲酸相联，形成带有羧基的沙丁胺醇活性中间体，再以乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺为交联剂，将带有羧基的沙丁胺醇活性中间体与载体蛋白上的氨基偶联，透析及冷冻干燥。

3.如权利要求2所述沙丁胺醇人工抗原的制备方法，其特征在于制备所述的活化对氨基苯甲酸时，按摩尔比为1～2∶1的比例称取亚硝酸钠和对氨基苯甲酸，将二者分别溶在蒸馏水和盐酸中，冰浴搅拌，将亚硝酸钠水溶液逐滴加入到对氨基苯甲酸的盐酸溶液中，避光反应0.5-1.5小时。

4.如权利要求2所述沙丁胺醇人工抗原的制备方法，其特征在于制备所述带有羧基的沙丁胺醇活性中间体时，按照与活化对氨基苯甲酸的摩尔比为0.5-2∶1的比例称取沙丁胺醇，溶在冰冷的pH为8.5-9.5、氯化钠浓度为0.15-0.16mol/L的硼砂缓冲溶液中，冰浴搅拌，逐滴加入活化对氨基苯甲酸溶液0.5-1.5ml，室温避光反应2-6小时。

5.如权利要求2所述沙丁胺醇人工抗原的制备方法，其特征在于所述带有羧基的沙丁胺醇活化中间体与载体蛋白上的氨基偶联时，向带有羧基的沙丁胺醇活性中间体溶液中加入硼酸晶体调pH至7.0-8.0，然后按载体蛋白与沙丁胺醇的摩尔比为1∶20～40的比例称取载体蛋白加入上述带有羧基的沙丁胺醇活性中间体溶液中，使载体蛋白的终浓度为8-12mg/ml，然后再按沙丁胺醇活性中间体与乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺、羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1∶8-12∶3～7的比例将三者合在一起，室温下搅拌3～5小时。

6.如权利要求2所述沙丁胺醇人工抗原的制备方法，其特征在于所述透析和干燥为：将沙丁胺醇与载体蛋白上的氨基偶联产生的偶联物溶液转移至透析袋中，以pH为7.30～7.50、浓度为0.01mol/L～0.02mol/L的磷酸缓冲液为透析外液，在0～4℃下搅拌透析70～80小时，然后改用蒸馏水为透析外液，在0～4℃下搅拌透析20～30小时，每5-7小时更换一次透析外液，将透析袋内溶液冷冻干燥。

7.权利要求1所述的沙丁胺醇人工抗原在制备沙丁胺醇多克隆抗体中的应用。