[发明专利]斑节对虾杆状病毒现场快速高灵敏检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种斑节对虾杆状病毒现场快速高灵敏检测试剂盒，其特征是该检测试剂盒包括：

(1)采样管，用来盛放、研磨待检样品；

(2)漂洗管，内装蒸馏水；

(3)核酸变性管，内装TE缓冲液；

(4)扩增检测管，内装扩增反应液和核酸染料，扩增反应液由以下组份组成：扩增引物的上游引物1和下游引物1各1～2μM，扩增引物的上游引物2和下游引物2各0.1～0.4μM，dATP、dTTP、dGTP和dCTP各0.8～2.0mM，MgCl₂ 4～10mM，甜菜碱0.6～1.2M，Tris-HCl 10～40mM，KCl 10～20mM，MgSO₄ 1～4mM，(NH₄)₂SO₄6～12mM，Triton X-100 0.05％～1.0％，具有链置换活性的DNA聚合酶2～20U；扩增引物的核酸序列如下：

上游引物1：5′-CCAGATTCCATAGGCAATAGATGATTTTTTAGAATTCAACGATATGAACGG

下游引物1：5′-AACAGACACTTATGAGATGCCATCTTTTGATGATGTTGGTGTGCGG

上游引物2：5′-CTCCAGGGGATAATCCAATT

下游引物2：5′-TGAGGAGACTTCCAAGAGT；

(5)阴性对照管，内装无斑节对虾杆状病毒核酸的FTA膜片；

(6)阳性对照管，内装吸附了斑节对虾杆状病毒核酸的FTA膜片；

(7)快速干燥液；

(8)FTA膜片、研磨棒、牙签和吸管；

(9)包装盒，内装一块有多个小孔的泡沫板或海绵块；

(10)使用说明书。

2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其中所述的核酸染料为分子生物学中应用的核酸染料。

3.如权利要求2所述的检测试剂盒，其中所述的核酸染料为SYBR Green、GelRed、GelGreen、GoldView^TM或GeneFinder^TM任一种。

4.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于所述的快速干燥液是亲水性且易挥发的醇类物质。

5.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于上述扩增检测管内的核酸染料粘附于扩增检测管的管壁内侧上方或扩增检测管的管盖内侧。

6.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于所述的FTA膜片为英国Whatman公司用来制备核酸的FTA卡片。