[发明专利]一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法及其临床应用

说明书

技术领域

本发明属于药用植物化学成分的分离方法，具体涉及一种中药菝葜组合物的化学成分分 离方法及其临床应用。

背景技术

菝葜组合物主要由中药材菝葜和土茯苓经水提醇沉制的浸膏加适量辅料制得。临床主要 用于治疗银屑病；虽然临床应用多年，疗效较好，但对其药物成分一直不甚明确。

菝葜(Smilax china L.)为百合科菝葜属菝葜.的根状茎；(菝葜叶也入药)。

现有技术报道，菝葜根含菝葜素(Smilaxin)，异内杞甙(Isoengeletin)，齐墩果 酸(Oleanolic acid)，山柰素(Kaempferide)，二氢山柰素(Dihydrokaempferide)，β- 谷甾醇(β-Sitosterol)，β-谷甾醇葡萄糖甙(β-Sitosteroylglucoside)，薯蓣皂甙的原 皂甙元A(Prosapogenin A of dioscin)，薯蓣皂甙(Dioscin)，纤细薯蓣皂甙(Gracillin)， 甲基原纤细薯蓣皂甙(Methylprotogracillin)，甲基原薯蓣皂甙(Methylprotodioscin) 等。

其性味甘，温；归足厥阴、少阴经。其药理作用有利尿、解毒和抗锥虫作用。功用 主治，祛风利湿，解毒消肿。根状茎：治风湿关节痛，跌打损伤，胃肠炎，痢疾，消化不良， 糖尿病，乳糜尿，白带，癌症；叶：外用治痈疖疔疮，烫伤。

土茯苓(RHIZOMA SMILACIS GLABRAE)为百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Ro xb.的干燥根茎。

现有技术报道，土茯苓含菝葜皂甙类(Smilax saponins)，尚含提果皂甙元(Tigogenin) 和鞣质等。其性味甘、淡，平，归肝、胃经；功能与主治除湿，解毒，通利关节。用于湿 热淋浊，带下，痈肿，瘰疬，疥癣，梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛，筋骨疼痛。

发明内容

本发明的目的，是通过研究中药菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取 物的硅胶柱色谱法分离、测定；探索菝葜组合物的化学活性成分。

本发明是通过如下技术方案实施的：

研究一种中药菝葜组合物的化学成分分离方法，其特征是主要包括中药菝葜组合物水提 浸膏制备，菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取和对乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、 测定：

(1)菝葜组合物水提浸膏制备

中药材菝葜与土茯苓，按1∶1重量比混合，加煎煮量水煎煮三次，第一次3h，第二、三 次各2h，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.16～1.20/60℃，加入乙醇至含醇量 为55～60％，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.27～1.30/60℃的菝葜组合物浸膏， 备用；

(2)菝葜组合物水提浸膏的乙酸乙酯提取

将菝葜组合物的水提浸膏分散在水中呈混悬态，进行乙酸乙酯提取，其重量配比是：

菝葜组合物浸膏∶乙酸乙酯＝1∶10；

水浴回流提取2次，每次1h，提取液浓缩至干，获得菝葜组合物的水提浸膏的乙酸乙 酯提取物，备用；

(3)对菝葜组合物的水提浸膏的乙酸乙酯提取物的硅胶柱色谱法分离、测定 分作如下步骤

①拌样

重量比：菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物重量∶无水硅胶＝1∶3

无水硅胶加入到无水乙醇溶解的菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物溶液中，水浴加热， 挥干无水乙醇，使菝葜组合物浸膏乙酸乙酯提取物样品吸附在硅胶中，作为总样，备用；

②湿法上柱

初始流动相组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶3； 总样以湿润量的初始流动相拌匀，加入柱径100mm，柱高1000mm的玻璃层析柱中；

③室温下梯度洗脱

洗脱速度设置为250ml/0.5h，常压，室温下洗脱

开始使用初始流动相，收集洗脱液，分别标号存放；

每250ml收集一瓶，水浴回流浓缩，并点薄层板检查；

至59瓶后换1号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶2；

至133瓶后换2号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝1∶1；

至216瓶后换3号流动相：组成为容量比，乙酸乙酯∶环己烷＝2∶1；

至248瓶后换4号流动相：组成为容量比，3号流动相∶95％乙醇＝10∶1；