[发明专利]一种防治小麦病害的芽孢杆菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.芽孢杆菌(Bacillussp.)E1R-j CGMCC No.2134。

2.制备权利要求1所述的芽孢杆菌E1R-j菌株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将来自中国陕西省田间自然生长的小麦根系用自来水冲洗后展开晾干，每株取1/4根系剪碎，各植株的根段样品混合后称取1g进行表面消毒；

2)将消毒后的材料在消毒研钵中加9mL无菌水研磨至糊状，取原液、稀释100倍液和1000倍液，分别摇匀后取200μL涂在加有多菌灵的PDA平板上，每个处理重复3皿，在27℃下培养1周后，可分离到E1R-j菌株，于-80℃保藏。

3.根据权利要求2所述的芽孢杆菌E1R-j菌株的制备方法，其特征在于，所述的表面消毒的条件是：样品先用70％酒精处理60s，接着在浓度为3.125％NaClO中处理6min，再用70％酒精处理30s，最后用无菌水冲洗3～5次。

4.根据权利要求2所述的芽孢杆菌E1R-j菌株的方法，其特征在于：所述的多菌灵是浓度为50μg/mL的25％可湿性粉剂。

5.权利要求1所述的芽孢杆菌E1R-j菌株的菌体，其特征在于，它是按照下列方法制备的：将—80℃保藏的E1R-j菌株接种在NA培养基上，25～28℃培养2d后，将其单菌落接种到100mL LB培养液中，于37℃、150rpm黑暗振荡培养18～24h，然后按照1％的种子液接种到100mL的LB培养液中，于28℃、150rpm黑暗振荡培养40～48h，所得菌液经8000～10000rpm离心20min后，所得沉淀即为芽孢杆菌E1R-j菌株的菌体。

所述的NA培养基由10g蛋白胨、5g NaCl、3g酵母粉、14g琼脂粉和1000mL蒸馏水组成；所述的LB培养液由10g蛋白胨、10g酵母粉、5g NaCl、1000mL蒸馏水组成，其pH值为7.2。

6.权利要求1所述的芽孢杆菌E1R-j的抗菌活性物质，其特征在于，它是按照下列方法制备的：将—80℃保藏的E1R-j菌株接种在NA培养基上，25～28℃培养48h后，将其单菌落接种到100mL LB培养液中，于37℃、150rpm黑暗振荡培养18～24h，然后按照1％的种子液接种到100mL的LB培养液中，于28℃、150rpm黑暗振荡培养40～48h，所得菌液经8000rpm离心20min后，所得的无菌上清液用80％饱和度硫酸铵盐析，4℃过夜，经12000rpm离心30min所得沉淀进行透析并浓缩的物质。

7.权利要求1所述的芽孢杆菌E1R-j在防治小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦条锈病及促进小麦种子萌发和小麦生长中的应用。

8.权利要求5所述的芽孢杆菌E1R-j菌体在防治小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦条锈病及促进小麦种子萌发和小麦生长中的应用。

9.权利要求6所述的芽孢杆菌E1R-j的抗菌活性物质在防治小麦全蚀病、小麦白粉病、小麦条锈病及促进小麦种子萌发和小麦生长中的应用。