[发明专利]栽培水稻成熟胚高频植株再生方法

权利要求书

1.一种栽培水稻成熟胚高频植株再生方法，水稻的愈伤组织诱导培养基、继代培养基、分化培养基和幼苗壮根培养基均在高压灭菌前调整pH值为5.8～6.1；愈伤组织诱导、继代、分化和幼苗壮根均在试管中完成，培养过程中的环境温度为28℃～30℃，其特征在于：

外植体为水稻种子；

愈伤组织诱导培养基以M8的大量元素、有机成分、微量元素的基本成分为基础，再分别添加质量比为3％的白砂糖、0.8％的琼脂条、0.5％的山梨醇、1～2mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸、1mg/L的脱落酸，0.3～2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤和0.2mg/L的激动素；

继代培养基以M8的大量元素、有机成分、微量元素、铁盐为基本组分，添加质量比3％的白砂糖、0.8％的琼脂条、0.5～1mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸和0.1～0.2mg/L的激动素；

分化培养基以MS的大量元素、有机成分、微量元素的基本成分为基础，添加1g/L的活性炭、8g/L的琼脂条、30g/L的白砂糖、0.5mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸和1mg/L的苯基脲类细胞分裂素；

幼苗壮根培养基以1/2MS基本成分为基础，添加15g/L的白砂糖、10g/L的琼脂条、0.2mg/L的萘乙酸和0.4mg/L的多效唑；

在愈伤诱导培养的前7天全暗培养，之后转入光下培养，获得愈伤组织；选取浅黄色、干燥、颗粒状愈伤组织转入继代培养基光下培养；然后选取蓬松状愈伤组织转入分化培养基上光下培养；再选取含绿芽的颗粒状愈伤组织转入幼苗壮根培养基继续培养，长成3片叶且根系发达后，形成健壮试管植株。

2.根据权利要求1所述的栽培水稻成熟胚高频植株再生方法，其特征在于：愈伤组织诱导培养耗时28～35天；继代培养、分化培养和幼苗壮根培养分别耗时14～21天；在愈伤组织诱导、继代、分化和幼苗壮根期间的光下培养期间，光照时间为12～14h/d，光强为1800～2100Lux。

3.根据权利要求1所述的栽培水稻成熟胚高频植株再生方法，其特征在于：所述的水稻为籼稻，愈伤组织诱导培养基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量为1mg/L，6-苄基腺嘌呤的添加量为1.5～2mg/L。

4.根据权利要求1所述的栽培水稻成熟胚高频植株再生方法，其特征在于：所述的水稻为粳稻，愈伤组织诱导培养基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量为2mg/L，6-苄基腺嘌呤的添加量为0.3～0.6mg/L。

5.根据权利要求1所述的栽培水稻成熟胚高频植株再生方法，其特征在于：所述的水稻为杂交稻，愈伤组织诱导培养基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量为1～2mg/L，6-苄基腺嘌呤的添加量为0.6～1.5mg/L。