[发明专利]一种提取蓝莓中多糖的工艺

说明书

技术领域：

本发明涉及一种提取多糖工艺，尤其是一种从蓝莓鲜果中提取多糖的方法。

背景技术：

蓝莓(Blueberry)学名越桔，别名有笃斯、嘟嗜、都柿、甸果等，属于杜鹃花科越桔属植物。果实呈蓝色，并披一层白色果粉，果肉细腻，果味酸甜，风味独特，具有清爽宜人的香气，可鲜食，亦可加工成果汁饮料和果酒。蓝莓的果实营养丰富，对从美国引进的14个品种的蓝莓果实分析测定结果表明：蓝莓鲜果中含蛋白质、脂肪、碳水化合物，V_A、V_E、超氧化物歧化酶(SOD)等，其它维生素均高于其它水果。此外，蓝莓的微量元素含量也很高，鲜果中含钙、磷、镁、锌、铁、锗、铜等。除含有常见的营养成分外，蓝莓果实中还含有尼克酸、黄酮等特殊成分，营养丰富，因此，常被誉为“浆果之王”。

80年代以来，科学家们对植物多糖，特别是对中药中的多糖研究产生了浓厚的兴趣，至今已相继报道了100多种具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗感染、降血糖等多种生理活性的中药多糖，有的已在临床用于肿瘤、肝炎、心血管等疾病的辅助治疗和康复，其中最重要的药理作用当推免疫促进作用。已有的大量药理和临床应用表明，这些功能确切的多糖，其原生药大多属于补益类中药。近来的药理研究和临床应用均表明其具有显著的免疫增强作用，而其有效成分为多糖或糖缀合物glycoconjugates，包括糖肽蛋白多糖等不同的糖肽其免疫活性的表现形式也不相同，有的表现为细胞免疫功能强，有的表现为体液免疫功能强，而有的还具有显著的抗脂质过氧化作用，抑制LDL的氧化这些糖肽类化合物的结构分析表明，它们的共同特点是多糖含量高，有的可高达90，糖结构有其共性，即均以Ara为末端，但也各具个性，有的主链是1-6连结，有的是1-4连结，有的还结合色素。药理研究结果还表明这些糖肽类化合物中不但整体分子具有免疫活性，而且分子中的多糖链也具有免疫活性，有的比整体分子的作用还要强。抗肿瘤药将多糖作为抗肿瘤药是由于人们对当前癌症化疗药物不满意。虽然化学家们合成了无数个对癌细胞有相当强杀伤作用的化合物，但在杀死癌细胞的同时也同样损伤正常细胞，临床上表现出很多副作用，特别是化疗药物对患者免疫系统造成损害，因此多糖类免疫调节剂在肿瘤的治疗上很有吸引力。

蓝莓具有丰富的多糖含量，其中低聚多糖约6g/100g鲜重，而纤维素含量约4.6g/100g鲜重，可作为植物多糖的一个重要来源。但是从蓝莓中提取多糖的方法国内尚无报道。

发明内容：

本发明的目的是为了提供一种产品收率高，能源消耗少，成本低，产量大，多糖纯度达97％以上，保持原有风味，易于实现工业化的多糖提取工艺。

本发明所提出的制备方法如下：

1)酶解：取蓝莓鲜果，加入其重量0.5倍量的含纤维素酶的去离子水浸泡3～4h，使其酶解。

用纤维素酶提取既可以将蓝莓组织结构破坏，使提取更容易进行，提高提取效率，同时纤维素水解后也能转化成多糖，因此可提高多糖的提取率。

上述酶解工艺中，纤维素酶在去离子水中的含量为0.5～3.0％，用盐酸调节pH为4，温度控制在40～45℃。

2)压榨：在常温下压榨。

浸泡和高压压榨能比较彻底地将蓝莓中的水溶性有效成分提取出来，靠机械作用在常温条件下破坏蓝莓组织结构，但不涉及除水解以外的反应，方便下一步的提纯操作。

上述提取蓝莓中多糖的工艺，其压榨工艺条件如下：将酶解液在常温80～100MPa下冷压，用液料比为0.5的去离子水浸泡0.5～1h，在上述条件下冷压，收集两次压榨液。

3)大孔树脂除杂：合并后的压榨液经过非极性大孔树脂除杂。

非极性大孔树脂可以在常温下吸附本工艺不需要的小分子物质而使多糖通过，保证小分子有效成分在不被破坏的情况下分离出去，给技术的升级提供了切入点；本工艺是截留小分子，透过所需要大分子多糖，所以操作连续，可在一定程度上缩短生产周期。

上述提取蓝莓中多糖的工艺，其特征是所述非极性大孔树脂柱可用D101、PSD、HZ802大孔树脂。

4)大孔树脂吸附：透过液用极性大孔树脂将多糖吸附，再用乙醇洗脱多糖。

极性大孔树脂可在常温下吸附本工艺需要的多糖类物质，不会引入新的杂质，同时大孔树脂再生方便，可重复利用。

上述提取蓝莓中多糖的工艺，其特征是所述极性大孔树脂可用LSA-5B，D4020，D201大孔树脂。

上述提取蓝莓中多糖的工艺，其特征是所述极性大孔树脂吸附后用3～4倍量柱体积的50～60％乙醇洗脱。

5)膜浓缩：用纳滤膜将洗脱液膜浓缩，得截留浓缩液。