[发明专利]一种应用纳米技术促进铁皮石斛快速增殖的组培方法

权利要求书

1.一种应用纳米技术促进铁皮石斛快速增殖的组培方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

(1)外植体的选择与灭菌；

(2)腋芽的萌发；

(3)丛生芽诱导；

(4)成苗培养；

(5)炼苗和移栽；

在步骤(1)中，选择当年萌生的幼嫩茎尖，先用无菌水冲洗干净，去除叶鞘，切成具有1-4个腋芽和长3-5cm段，用0.5g/L的多菌灵溶液浸泡2-3个小时，再用75％乙醇消毒30秒钟，用0.1％升汞水浸泡20分钟，无菌水冲洗5-6次，取出材料，切成具有一个腋芽和长度为1cm的小段，最后用12％次氯酸钠杀菌30秒钟，无菌水冲洗5-6次；

在步骤(2)中，所采用的培养基为：加入5mg/mL-20mg/mL浓度的纳米颗粒材料，0.5mg/L的6-BA、1.0mg/L的NAA和150.0mg/L的椰子汁的1/2N₆培养基；培养条件为在25±1℃、光照1500-2000Lx和光照时间为8-10小时/天；

在步骤(3)中，所采用的培养基为：加入5mg/mL-20mg/mL浓度的纳米颗粒材料，1.0mg/L NAA和150.0mg/L的椰子汁的1/2N₆培养基；培养条件为在25±1℃、光照1500-2000Lx和光照时间为8-10小时/天；

在步骤(4)中，所采用的培养基为：加入5mg/mL-20mg/mL浓度的纳米颗粒材料，0.1mg/L的6-BA和1.0mg/L NAA的2/3MS成苗培养基；培养条件为在在25±1℃、光照1500-2000Lx和光照时间为8-10小时/天。