[发明专利]乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法

权利要求书

1.一种乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，取各微藻置于常规培养装置中进行混合培养，培养过程中添加乳酸杆菌进行调控，使各微藻均衡生长，各微藻经扩培至生物总量增长1～3个数量级后形成菌藻混合生物液，将菌藻混合生物液和养殖池中的养殖排放废水引入扩培池中，保持乳酸杆菌在扩培池中的密度为10⁴～10⁵CFU/mL，使菌藻在培养过程中协同净化养殖排放废水，所述各微藻为微绿球藻、隐藻和绿色颤藻的混合，常规培养装置中各微藻的初始接种密度为10⁴～10⁵ind/mL，各微藻的添加比例为0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.7～1.0，常规培养装置中乳酸杆菌的添加密度为10³～10⁴CFU/mL，乳酸杆菌加入常规培养装置前需经过初步培养，其初步培养过程为：调节MRS液体培养基的pH为6.7～7.0，煮沸溶解，121℃灭菌15min，将备好的乳酸杆菌菌种活化后接入200mlMRS液体培养基中，置于30℃恒温充气培养20～24h即可。

2.根据权利要求1所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，保持常规培养装置中氮的浓度为12～15mg/L，磷的浓度为2～4mg/L，铁的浓度为0.10～0.14mg/L。

3.根据权利要求2所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，常规培养装置中氮源为硝酸铵、氯化铵、硫酸铵、硝酸钠、硝酸钾或尿素中的一种或几种，磷源为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或过磷酸钙中的一种或几种，铁源为柠檬酸铁。

4.根据权利要求1所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，常规培养装置中培养条件为：温度26～28℃，pH7.0～8.0，光照强度4000～5500Lx，光暗比为12h∶12h～14h∶10h，盐度12～18‰。

5.根据权利要求1所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，乳酸杆菌初步培养中采用的MRS液体培养基在每升蒸馏水中包含：胰蛋白胨8～12g，琼脂14～17g，酵母提取物5～7g，柠檬酸氢二铵2～4g，葡萄糖18～24g，吐温801～3ml，NaAC·3H₂O 5～7g，K₂HPO₄ 2～4g，MgSO₄·7H₂O 0.5～1.0g，MnSO₄·H₂O 0.25～0.50g。

6.根据权利要求1所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，制备的乳酸杆菌在加入常规培养装置前还需经过离心，调节离心机的转速为8000～10000rpm，离心8～12min，弃去上清液，再用无菌生理盐水冲洗，并重复冲洗2～3次。

7.根据权利要求1所述的乳酸杆菌调控微藻混合培养及协同净化养殖排放水的方法，其特征在于，在养殖水体水色为鲜绿色、豆绿色或绿褐色，养殖水体浮游微藻生物多样性指数大于1.60的养殖池中，筛选出优势度大于0.15的各微藻进行混合培养，所述各微藻为微绿球藻、隐藻和绿色颤藻的混合，常规培养装置中各微藻的初始接种密度为10⁴～10⁵ind/mL，各微藻的添加比例为0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.7～1.0。