[发明专利]一种里氏木霉表达盒及其重组菌株和应用

权利要求书

1、一种里氏木霉表达盒，其特征在于该表达盒是由里氏木霉甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子、外源目的基因和里氏木霉纤维二糖水解酶终止子组成。

2、根据权利要求1所述里氏木霉表达盒，其特征在于所述表达盒的PCR扩增引物为：

(1)上游引物P1，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

(2)下游引物P2，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3、一种表达载体，其特征在于该表达载体含有权利要求1所述里氏木霉表达盒。

4、一种重组菌株，其特征在于该重组菌株是由权利要求1所述表达盒和带有筛选标记的载体共转化里氏木霉原生质体，培养并筛选转化子制备而得。

5、根据权利要求4所述重组菌株，其特征在于所述带有筛选标记的载体为pAN7-1。

6、根据权利要求4所述重组菌株，其特征在于所述筛选是以潮霉素B作为筛选剂。

7、权利要求4所述重组菌株在制备蛋白质药物、工业酶制剂或饲料添加剂中的应用。

8、根据权利要求7所述应用，其特征在于所述工业酶制剂为木聚糖酶。

9、根据权利要求8所述应用，其特征在于重组菌株生产木聚糖酶时所用葡萄糖蛋白胨发酵培养基的配方为：将葡萄糖60.0g、蛋白胨6.0g、(NH₄)₂SO₄1.4g、KH₂PO₄ 2.0g、尿素0.3g、CaCl₂ 0.3g、Mandels营养盐溶液100ml、柠檬酸缓冲液50ml和Mandels微量元素溶液1ml混合后，用蒸馏水溶解并定容至1L；所述Mandels营养盐浓缩液的配方为：将14g(NH₄)₂SO₄、3g尿素、20g KH₂PO₄、4g CaCl₂·2H₂O和3g MgSO₄·7H₂O混合后，用蒸馏水溶解并定容至1L；所述柠檬酸缓冲液的配方为：将一水合柠檬酸210.0g和NaOH 78.0g混合后，用蒸馏水溶解并定容至1L；所述Mandels微量元素浓缩液的配方为：将FeSO₄·7H₂O 5.0g、MnSO₄·H₂O 1.6g、ZnSO₄·7H₂O 1.4g和CoCl₂·6H₂O 3.7g混合后，用蒸馏水溶解并定容至1L。