[发明专利]肺炎支原体快速检测试剂盒及使用方法有效
| 申请号： | 200910039674.1 | 申请日： | 2009-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN101665827A | 公开（公告）日： | 2010-03-10 |
| 发明（设计）人： | 孙宜峰;曾冰冰;胡荣;刘义江 | 申请（专利权）人： | 珠海市银科医学工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/78;C12R1/35 |
| 代理公司： | 广州市红荔专利代理有限公司 | 代理人： | 王贤义 |
| 地址： | 519090广东省珠*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肺炎 支原体 快速 检测 试剂盒 使用方法 | ||
1.一种肺炎支原体快速检测试剂盒，其特征在于，其中的试剂包括：
(1)环介导恒温反应管：
包括10×ThermoPol反应缓冲液、5-10pmol的引物1、5-10pmol的引物2、20-40pmol的引物3、20-40pmol的引物4、1.4-1.6mmol/L的dNTP、4-6mmol/L的硫酸镁、0.8-1.2mol/L的甜菜碱、0.4-0.5mmol/L的氯化锰和25-50μmol/L的钙黄绿素；
其中，10×ThermoPol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mM的氯化钾、100mM的硫酸铵、20mM的硫酸镁和1％的曲拉通X-100；
其中所述dNTP中含有的dATP、dTTP、dCTP、dGTP的质量比为1∶1∶1∶1；
其中所述引物1为：5’-accctcgggggcagtcag-3’；
所述引物2为：5’-ctgattgtccctgctggtcc-3’；
所述引物3为：5’-gttcagagctggaggttggctttttcgatgattacaggcggttc-3’；
所述引物4为：5’-gggcggggtgaaggaatgatattttctcgtgaacttggtgtggt-3’；
(2)Bst DNA聚合酶：8U/μL。
2.一种肺炎支原体快速检测试剂盒，其特征在于，其中的试剂包括：
(1)环介导恒温反应管：
该环介导恒温反应管中每管22μL反应液的组成为：2.5μL 10×ThermoPol反应缓冲液、1μL 10pmol/μL的引物1、1μL 10pmol/μL的引物2、1μL 40pmol/μL的引物3、1μL 40pmol/μL的引物4、3.5μL 10mmol/LdNTP、1μL 100mmol/L硫酸镁、5μL 5mol/L甜菜碱、1μL 12.5mmol/L氯化锰、1μL 625μmol/L钙黄绿素和4μL的无菌双蒸水；
其中，10×ThermoPol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基 甲烷-盐酸、100mM的氯化钾、100mM的硫酸铵、20mM的硫酸镁和1％的曲拉通X-100；
其中所述dNTP中含有的dATP、dTTP、dCTP、dGTP的质量比为1∶1∶1∶1；
其中所述引物1为：5’-accctcgggggcagtcag-3’；
所述引物2为：5’-ctgattgtccctgctggtcc-3’；
所述引物3为：5’-gttcagagctggaggttggctttttcgatgattacaggcggttc-3’；
所述引物4为：5’-gggcggggtgaaggaatgatattttctcgtgaacttggtgtggt-3’；
(2)Bst DNA聚合酶：8U/μL。
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