[发明专利]桑叶γ-氨基丁酸的提取方法及其应用

权利要求书

1.一种桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于包括以下步 骤：

(1)桑叶干燥后进行粉碎；

(2)取干桑叶粉加水浸泡，超声波-微波协同萃取，收集萃取 上清液，旋转蒸发浓缩制得γ-氨基丁酸粗提液；

(3)γ-氨基丁酸粗提液经无水乙醇沉淀去除部分杂蛋白和多糖 类物质，再经三级分离纯化制得γ-氨基丁酸白色结晶体。

2.根据权利要求1所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤(1)所述桑叶干燥是采摘桑叶叶片，洗净晾干后烘干粉碎； 所述烘干是置于烘箱，在83～87℃烘28～32min后降温至63～67 ℃烘4～4.5h。

3.根据权利要求1所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤(2)所述桑叶粉与水的料液比按照桑叶粉重量克数：水体 积毫升数为1∶30～1∶35；浸泡时间为13～17min；所述微波为144W、 超声波为50W；萃取时间为160～170秒。

4.根据权利要求1所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤(3)包括以下步骤：

A用无水乙醇沉淀法去除部分杂蛋白和多糖类物质；

B用大孔树脂S-8进行一级分离纯化；

C用葡聚糖凝胶G-10进行二级分离纯化；

D用732磺酸型阳离子树脂进行三级分离纯化；

E将经过三级分离纯化后的桑叶γ-氨基丁酸产物经旋转蒸发、 冷冻干燥，获得结晶。

5.根据权利要求4所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤A是取粗提液，按体积比1∶2倍量加入无水乙醇，过夜，在 3000r/min离心10min，弃沉淀，旋转蒸发浓缩。

6.根据权利要求4所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤B是树脂湿法装柱，充分平衡后，取经醇沉淀法分离的提取 液，调pH值为5，上样，流速控制2mL/min，收集洗脱液得浓缩液。

7.根据权利要求4所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤C是将浓缩液上柱，蒸馏水洗脱，流速3mL/min，收集洗 脱液，旋转蒸发得浓缩液。

8.根据权利要求4所述桑叶γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步骤D是将步骤C制备的浓缩液调pH值为3，上柱，流速控制2 mL/min，吸附完毕后用蒸馏水洗至pH值为6，用0.25mol/L氨水进 行洗脱，洗脱过程中不断用茚三酮丙酮试纸检测pH变化，当茚三酮 反应呈蓝色，pH值为6时，收集流出液，直至茚三酮蓝色反应消失 为止，合并流出液，进行浓缩，冷冻干燥。