[发明专利]乙型肝炎病毒YMDD基序突变检测特异性引物、液相芯片及方法

权利要求书

1.一种乙型肝炎病毒YMDD基序突变检测液相芯片，其特征是，主要包括有：

(1).ASPE引物：每种ASPE引物由3’端的针对目的基序突变的特异性引物序列和5’端的tag 序列组成，所述针对目的基序突变的特异性引物序列包括有：分别针对rtL80I/V的SEQ ID NO.1-4；分别针对rtV173L的SEQ ID NO.5-7；分别针对rtL180M的SEQ ID NO.8-10； 分别针对rtA181V/T的SEQ ID NO.11-19；分别针对rtM204V/I/S的SEQ ID NO.20-29；和/ 或分别针对rtN236T的SEQ ID NO.30-33；所述对应的tag序列选自SEQ ID NO.34-66；

(2).分别包被有特异的anti-tag序列的微球，所述anti-tag序列与(1)中所选的tag序列互补 配对，所述anti-tag序列选自SEQ ID NO.67-99，上述每种微球具有不同颜色编码；

(3).用于扩增具有突变位点rtL80I/V、rtV173L、rtL180M、rtA181V/T、rtM204V/I/S、 和/或rtN236T的目标序列的引物，所述用于扩增目标序列的引物包括为：SEQ ID NO.100～ SEQ ID NO.101；和/或SEQ ID NO.102～SEQ ID NO.103。

2.根据权利要求1所述的乙型肝炎病毒YMDD基序突变检测液相芯片，其特征是，主要包括 有：

(1).ASPE引物，包括有：针对rtL80I/V的由SEQ ID NO.1和34组成的序列、由SEQ ID NO.2 和35组成的序列、由SEQ ID NO.3和36组成的序列、和由SEQ ID NO.4和37组成的序列； 分别针对rtV173L的由SEQ ID NO.5和38组成的序列、由SEQ ID NO.6和39组成的序列和 由SEQ ID NO.7和40组成的序列；分别针对rtL180M的由SEQ ID NO.8和41组成的序列、 由SEQ ID NO.9和42组成的序列和由SEQ ID NO.10和43组成的序列；分别针对rtA181V/T 的由SEQ ID NO.11和44组成的序列、由SEQ ID NO.12和45组成的序列、由SEQ ID NO.13 和46组成的序列、由SEQ ID NO.14和47组成的序列、由SEQ ID NO.15和48组成的序列、 由SEQ ID NO.16和49组成的序列、由SEQ ID NO.17和50组成的序列、由SEQ ID NO.18 和51组成的序列和由SEQ IDNO.19和52组成的序列；分别针对rtM204V/I/S的由SEQ ID NO.20和53组成的序列、由SEQ ID NO.21和54组成的序列、由SEQ ID NO.22和55组成的 序列、由SEQ ID NO.23和56组成的序列、由SEQ ID NO.24和57组成的序列、由SEQ ID NO.25和58组成的序列、由SEQ ID NO.26和59组成的序列、由SEQ ID NO.27和60组成的 序列、由SEQ ID NO.28和61组成的序列和由SEQ ID NO.29和62组成的序列；和/或分别针 对rtN236T的由SEQ ID NO.30和63组成的序列、由SEQ ID NO.31和64组成的序列、由SEQ ID NO.32和65组成的序列和由SEQ ID NO.33和66组成的序列；

(2).分别包被有特异的anti-tag序列的微球，所述anti-tag序列与(1)中所选的tag序列互补 配对，所述anti-tag序列选自SEQ ID NO.67-99，上述每种微球具有不同颜色编码；

(3).用于扩增具有突变位点rtL80I/V、rtV173L、rtL180M、rtA181V/T、rtM204V/I/S、和/ 或rtN236T的目标序列的引物，所述引物为：SEQ ID NO.100～SEQ ID NO.101；和/ 或SEQ ID NO.102～SEQ ID NO.103。

3.根据权利要求1-2任一项所述的乙型肝炎病毒YMDD基序突变检测液相芯片，其特征是， 所述anti-tag序列与微球连接中间还设有间隔臂序列。