[发明专利]鼠李糖乳杆菌M8、鼠李糖乳杆菌SLP及其制备方法

权利要求书

1.一株鼠李糖乳杆菌M8，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)M8是保 存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心且保藏号为CGMCC No.3002的菌株。

2.一株鼠李糖乳杆菌SLP，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌SLP是在权利要求1所述鼠 李糖乳杆菌M8中表达有乳酸菌表层蛋白基因的工程菌。

3.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌SLP，其特征在于：所述乳酸菌表层蛋白是指瑞士乳 杆菌(Lactobacillus helveticus)表层蛋白。

4.根据权利要求3所述的鼠李糖乳杆菌SLP，其特征在于：所述瑞士乳杆菌表层蛋白占所 述鼠李糖乳杆菌SLP菌体蛋白的30％～60％。

5.一种如权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，包括以下步骤：以权利要求1 所述鼠李糖乳杆菌M8为宿主，将乳酸菌表层蛋白基因通过电转化方法导入该宿主中，经温育 后所述乳酸菌表层蛋白基因在该宿主中成功表达，得到鼠李糖乳杆菌SLP。

6.根据权利要求5所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，其特征在于：所述乳酸菌表 层蛋白基因是以瑞士乳杆菌表层蛋白基因为模板设计引物，通过PCR扩增后得到，所述引物 的全长序列如下：

slp5F(5′-3′)CG GGATCC ATGAAGAAAAATTTAAG

slp5R(5′-3′)GG GGTACC TTATTCAAAGTTAGCAA

所述GGATCC为BamH I酶切位点，所述GGTACC为Kpn I酶切位点。

7.根据权利要求6所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，其特征在于：所述PCR扩增 反应的条件为：94℃～95℃预变性3min～5min；95℃变性1min；60℃～50℃退火30s～1min； 72℃延伸2min；10个循环；95℃变性1min；50℃退火1min；72℃延伸2min；25个循环； 72℃延7min。

8.根据权利要求5或6或7所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，其特征在于，所述 电转化的操作条件包括：电压1500V～1800V，电击时间为3ms～8ms。

9.根据权利要求5或6或7所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，其特征在于：所述 温育时的温度为37℃，温育的时间3h。

10.根据权利要求5或6或7所述的鼠李糖乳杆菌SLP的制备方法，其特征在于，所述 温育过程中用到的转化后培养基包括以下质量分数的组分：骨胶原多肽O.5％～1.5％、酵母膏 0.5％、葡萄糖0.5％、KH₂PO₄0.3％、吐温800.5％、西红柿汁5％、乙酸钠0.5％和柠檬酸钠0.2％。