[发明专利]一种载有抗肿瘤血管生成药物的多肽修饰的隐形纳米粒及其应用

权利要求书

1.一种载有抗肿瘤血管生成药物的K237多肽修饰的隐形纳米粒，其特 征在于，所述的隐形纳米粒由以下方法制备得到：

(a)、采用复乳法制备装载环磷酰胺的隐形纳米粒

将10mg环磷酰胺溶于0.5mlPBS缓冲溶液中，加入3ml含有30mg醛基聚乙二醇 聚乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸混合物的二氯甲烷溶液中，其中醛基聚 乙二醇聚乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸的比例为1∶20，连续超声160w， 25s后，缓慢加入3ml1％w/v胆酸钠溶液，160w超声25s后，加入40ml 0.5％胆酸 钠水溶液，室温下温和搅拌过夜，挥去有机溶剂，得到的纳米粒溶液在11,000×g 下离心45min，用蒸馏水洗两遍即得到装载环磷酰胺的隐形纳米粒(CTX-NP)；

(b)、CTX-NP表面K237多肽的修饰

取12ml 1×PBS，加入上述离心后的装载环磷酰胺的隐形纳米粒沉淀中， 用移液器吹打分散，混匀后转入小烧杯，按醛基与K237多肽摩尔比例1∶3加入 K237多肽和还原剂NaCNBH₃，磁力搅拌过夜，4℃下，11,000g离心45min，沉 淀即为含K237多肽修饰的CTX-NP(K237-CTX-NP)。

2.一种载有抗肿瘤血管生成药物的K237多肽修饰的隐形纳米粒，其特 征在于，所述的隐形纳米粒由以下方法制备得到：

(a)、采用复乳法制备装载阿霉素的隐形纳米粒

将10mg阿霉素溶于0.5mlPBS缓冲溶液中，加入3ml含有30mg醛基聚乙二醇聚 乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸混合物的二氯甲烷溶液中，其中醛基聚乙 二醇聚乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸的比例为1∶5，连续超声160w，25s 后，缓慢加入3ml1％w/v胆酸钠溶液，160w超声25s后，加入40ml 0.5％胆酸钠 水溶液，室温下温和搅拌过夜，挥去有机溶剂，得到的纳米粒溶液在11,000×g 下离心40min，用蒸馏水洗两遍即得到装载阿霉素的隐形纳米粒(DOX-NP)；

(b)、DOX-NP表面K237多肽的修饰

取12ml 1×PBS，加入上述离心后的DOX-NP沉淀中，用移液器吹打分散， 混匀后转入小烧杯，按醛基与K237多肽摩尔比例1∶3加入K237多肽和还原剂 NaCNBH₃，磁力搅拌过夜，4℃下，11,000g离心40min，沉淀即为含K237多 肽修饰的DOX-NP(K237-DOX-NP)。

3.一种载有抗肿瘤血管生成药物的K237多肽修饰的隐形纳米粒，其特 征在于，所述的隐形纳米粒由以下方法制备得到：

(a)、采用复乳法制备装载Endostatin的隐形纳米粒

将2mg Endostatin pDNA溶于0.5mlHEPES缓冲溶液中，加入2ml含有50mg醛 基聚乙二醇聚乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸混合物的二氯甲烷溶液中， 其中醛基聚乙二醇聚乳酸和甲氧基封端的聚乙二醇聚乳酸的比例为1∶5，冰浴 上，连续超声160w，25s后，缓慢加入3ml 1％w/v胆酸钠溶液，160w超声25s后， 加入35ml 0.5％胆酸钠水溶液，室温下温和搅拌过夜，挥去有机溶剂，得到的纳 米粒溶液在11,000×g下离心40min，用蒸馏水洗两遍即得到装载Endostatin 的隐形纳米粒(Endostatin-NP)；

(b)、Endostatin-NP表面K237多肽的修饰

取12ml 1×PBS，加入上述离心后的Endostatin-NP沉淀中，用移液器吹 打分散，混匀后转入小烧杯，按醛基与K237多肽摩尔比例1∶3加入K237多肽 和还原剂NaCNBH₃，磁力搅拌过夜，4℃下，11,000g离心40min，沉淀即为含 K237多肽修饰的Endostatin-NP(K237-Endostatin-NP)。