[发明专利]一种固定化氨基酰化酶的制备方法及其产品和应用有效
申请号: | 200910047876.0 | 申请日: | 2009-03-20 |
公开(公告)号: | CN101671664A | 公开(公告)日: | 2010-03-17 |
发明(设计)人: | 马士忠;李莉;马道功;元波;马士强;杨召鹏;袁明;张宁;董龙辉 | 申请(专利权)人: | 上海瀚鸿化工科技有限公司 |
主分类号: | C12N11/04 | 分类号: | C12N11/04;C12P41/00;C12P13/04 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 胡美强 |
地址: | 200237上海市徐*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固定 氨基 酰化酶 制备 方法 及其 产品 应用 | ||
1.一种固定化氨基酰化酶的制备方法,其特征在于包含下列步骤:在 水中,60-90℃下将固定化材料溶解,所述固定化材料为重量比为80-95:20-5 的卡拉胶和明胶,固定化材料与水的重量比为1-8∶99-92,然后降温至 40-60℃,再加入氨基酰化酶,氨基酰化酶与固定化材料的重量比为1-15∶ 99-85,混合均匀,然后将此混合液流加到温度为20-35℃的有机溶剂中,所 述有机溶剂为煤油、汽油、植物油、石油醚、苯和甲苯中的一种或多种,搅 拌,过滤得颗粒,将所得颗粒加入到含有戊二醛的KCl溶液中固化2小时,即 制得固定化氨基酰化酶。
2.如权利要求1所述的固定化氨基酰化酶的制备方法,其特征在于:所 述的卡拉胶和明胶的比例为88-92∶12-8。
3.如权利要求1所述的固定化氨基酰化酶的制备方法,其特征在于:所 述的有机溶剂为煤油、汽油和植物油中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的固定化氨基酰化酶的制备方法,其特征在于:所 述的KCl溶液中KCl的浓度为0.1N,其中戊二醛的浓度为0.5%。
5.一种由权利要求1所述的制备方法制得的固定化氨基酰化酶。
6.如权利要求5所述的固定化氨基酰化酶在催化合成光学活性的氨基酸 中的应用,其包含下列步骤:在固定化氨基酰化酶的催化下,乙酰化氨基酸 被拆分为光学活性的氨基酸。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述的应用包含下列步骤:
(1)水中,温度25-50℃,pH保持为7.5-7.8,DL-乙酰化氨基酸在碱的 作用下以及固定化氨基酰化酶的催化下反应;
(2)将步骤(1)得到的反应液过滤,将滤液浓缩结晶即可制得光学活 性的L-氨基酸,母液中的D-乙酰化氨基酸通过水解反应即可制得D-氨基酸。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于:所述的应用包含下列步骤: 在反应器中加入DL-乙酰化氨基酸水溶液,调节pH至7.5-7.8,加入颗粒状固 定化氨基酰化酶,用碱液维持pH,保持温度25-50℃,反应至pH不再变化后 DL-乙酰化氨基酸即被催化为L-氨基酸,然后过滤出固定化酶颗粒,将滤液 浓缩结晶,即得到光学活性的L-氨基酸;母液中未转化的D-乙酰化氨基酸通 过水解反应即可制得D-氨基酸,其中,反应器指流化床与反应釜。
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