[发明专利]固定化沙雷氏菌脂肪酶、制备方法及其催化拆分地尔硫卓手性前体的用途

权利要求书

1、一种用壳聚糖载体固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶，其特征为：该固定化酶以天然高分子化合物壳聚糖为载体骨架，酶通过戊二醛的交联作用共价结合固定在壳聚糖载体表面。

2、一种如权利要求1所述的壳聚糖载体固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶的制备方法，其特征是通过下述步骤：

1)在搅拌状态下，在含有0.5％～5％重量壳聚糖、0.5～5％重量酸的水溶液中，缓慢加入浓度为0.5～10％重量的碱水溶液，生成壳聚糖凝胶沉淀；或者将含有2％～5％重量壳聚糖、2～5％重量酸的水溶液逐滴滴入浓度为10～50％重量的强碱水溶液中，生成壳聚糖小球；所述的酸是甲酸或乙酸短链有机酸、或盐酸或硫酸无机酸；所述的碱是一价金属的氢氧化合物；

2)将1)制备的壳聚糖凝胶沉淀或壳聚糖小球的壳聚糖载体、粘质沙雷氏菌脂肪酶液和戊二醛在0～40℃反应1～24h，所述的壳聚糖载体、粘质沙雷氏菌脂肪酶液的重量比为1：5～1：20，壳聚糖载体和戊二醛的重量比为100：1～10：1。

3、如权利要求2所述的壳聚糖载体固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶的制备方法，其特征是步骤(2)的反应是将所述的壳聚糖凝胶沉淀或壳聚糖小球的壳聚糖载体直接投入粘质沙雷氏菌脂肪酶液中，在搅拌状态下加入戊二醛进行偶联固定化，戊二醛的终浓度为0.2％～2％重量/体积；或者将制备的1～30％湿重壳聚糖载体投入到戊二醛溶液中反应，再将预处理后的壳聚糖载体投入粘质沙雷氏菌脂肪酶液中偶联固定化。

4、如权利要求1所述的壳聚糖载体固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶的用途，其特征是用于催化拆分(±)对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯制备左旋对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯。

5、如权利要求3所述的壳聚糖载体固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶的用途，其特征是所述的制备在20～40℃，(±)对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯和固定化脂肪酶反应1～24h；反应在水-有机两相体系中进行，所述的的(±)对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯溶解在有机相中，浓度为0.05～1.5摩尔/升；水相溶液的pH为7.0～9.0；固定化脂肪酶的用量为1000～10,000U/L；有机相体积占反应体系总体积的5～95％。