[发明专利]三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒及其使用方法有效
申请号: | 200910049308.4 | 申请日: | 2009-04-14 |
公开(公告)号: | CN101865917A | 公开(公告)日: | 2010-10-20 |
发明(设计)人: | 张伟;王海蛟;赵卫国 | 申请(专利权)人: | 博阳生物科技(上海)有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/542 |
代理公司: | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人: | 许亦琳;魏秀莉 |
地址: | 201210 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 三碘甲腺原 氨酸 检测 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,包括:三碘甲腺原氨酸检测微粒、生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体和解离剂;其中三碘甲腺原氨酸检测微粒为二碘甲腺氨酸包被的发光微粒,解离剂为8-苯胺基-1-萘磺酸铵溶液、柳硫汞溶液、水杨酸钠溶液或者三氯醋酸钠溶液。
2.如权利要求1所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒中,发光微粒的粒径范围为100-400nm。
3.如权利要求2所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述发光微粒的粒径范围为150-300nm。
4.如权利要求1所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒中,发光微粒的表面官能团选自羧基或醛基。
5.如权利要求1所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒中,发光微粒的发光量为150,000-350,000光子数/100μg发光微粒。
6.如权利要求1权利要求所述三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒中,发光微粒与二碘甲腺氨酸的质量比例为(8-15)∶0.02。
7.如权利要求6所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述发光微粒与二碘甲腺氨酸的质量比例为10∶0.02。
8.如权利要求1-7中任一权利要求所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒由如下方法制得:
1)混合:将发光微粒与二碘甲腺氨酸混合于缓冲液中;
2)反应:加入缓冲液配制的EDAC溶液混合并反应;
3)往步骤2)获得的反应液中加入缓冲液配制的BSA溶液混匀并反应;
4)清洗产物,获得二碘甲腺氨酸包被的发光微粒。
9.如权利要求8所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述缓冲液为MES缓冲液或磷酸缓冲液。
10.如权利要求8所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述步骤a的混合液中,发光微粒的浓度为10-40mg/ml。
11.如权利要求8所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述步骤d的清洗的方式为离心法清洗。
12.如权利要求1所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体中,生物素与抗三碘甲腺原氨酸抗体的分子比例为(10-50)∶1。
13.如权利要求12所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体中,生物素与抗三碘甲腺原氨酸抗体的分子比例为30∶1。
14.如权利要求1所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述解离剂为8-苯胺基-1-萘磺酸铵的水溶液。
15.如权利要求14所述的的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述8-苯胺基-1-萘磺酸铵的水溶液中,8-苯胺基-1-萘磺酸铵的质量体积浓度为0.5-2mg/ml。
16.如权利要求1-7或9-15中任一权利要求所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒中还包括亲和素包被的感光微粒。
17.如权利要求16所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述亲和素包被的感光微粒中,亲和素与感光微粒的质量比例为1∶(3-10)。
18.如权利要求17所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述亲和素包被的感光微粒中,亲和素与感光微粒的质量比例为1∶5。
19.如权利要求16所述三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述三碘甲腺原氨酸检测微粒、生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体和亲和素包被的感光微粒分别独立包装;解离剂与生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体混合包装或独立包装;二碘甲腺氨酸包被的发光微粒、生物素标记的抗三碘甲腺原氨酸抗体和亲和素包被的感光微粒均为混悬液。
20.如权利要求19所述的三碘甲腺原氨酸的检测试剂盒,其特征在于,所述混悬液的溶剂选自HEPES缓冲体系或Tris缓冲体系。
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