[发明专利]沼湿草的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物的组织培养方法，尤其是涉及沼湿草的组织培养方法。

背景技术

沼湿草为禾本科沼湿草属植物，紧凑丛生，高可达90cm，冠幅45cm。叶有白色条纹，长17-25cm，花茎紧凑直立，稍带拱形，棕色圆锥形花序与绿色叶片对比鲜明，开花时，草的整体外观更加挺直。该草喜阳光充足或半阴环境，可耐轻度干旱或轻度潮湿的土壤，抗病虫害能力强。秋季，草体下部叶片会变成黄色或浅红色，观赏性更强。可用于园林绿化、岸边或庭院中栽培，具有优良的生态适应性和观赏价值。但是作为国外引进的新品种，该植物的引种数量较少，种苗供应受限制。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可提高繁殖速度和苗的整齐度的沼湿草的组织培养方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

沼湿草的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)无菌材料的获得

在春季取萌发的沼湿草的小芽，除去叶片，用自来水冲洗1-3h，再于超净工作台上，依次利用质量浓度为70-75％的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用无菌水冲洗4-6次，利用无菌滤纸吸干小球茎表面的水分后，将小球茎切成0.5-2cm的带腋芽的节段，节段接种于腋芽诱导培养基上；

(2)芽的分化和增殖

节段接种于腋芽诱导培养基上1-3周后，腋芽部位开始膨大，出现绿色突起，3-4周后节段上可以看见芽分生组织，再培养1-2个月，芽可以长到3-4cm长，将不定芽切下移入不定芽增殖培养基中进行增殖培养，不定芽基部的愈伤组织较多，但不定芽仍增殖较快，生长发育良好，并无玻璃化等不良现象；

(3)不定芽壮苗培养

在不定芽增殖培养基里诱导出的不定芽处于矮化状态，将不定芽分成小丛，然后将分成小丛的不定芽转至壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20-30天后可以长到3-4cm；

(4)生根培养

取3-4cm的不定芽小植株，转接入生根培养基中诱导生根，8-15天后小植株幼苗的基部分化出白色的根原基，25-35天后可以长至4-6cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100％；

(5)炼苗与移栽

在生根培养15-25天，根系长至0.5-2cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌幼苗，于室内开瓶炼苗1-3天，然后将苗取出，洗净其根部的琼脂，栽于温室内的苗床中驯化25-40天，即可移栽室外，并给予肥水管理，移栽成活率为90-100％。

所述的腋芽诱导培养基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.05-0.2mg/L。

所述的不定芽增殖培养基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.05-0.2mg/L。

所述的不定芽增殖培养基优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壮苗培养基包括MS+6-BA0.05-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

所述的壮苗培养基优选MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培养基包括MS+NAA0.1-0.3mg/L。

所述的生根培养基优选MS+NAA0.1mg/L。

所述的培养基还包括蔗糖20-40g/L、琼脂粉4-8g/L，培养基pH5.5-6.0，培养温度24-26℃，光照1500-2500lx。

与现有技术相比，本发明通过组织培养技术，极大提高了沼湿草的繁殖速度和苗的整齐度，可以实现育苗的工厂化大批量生产。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

(1)无菌材料的获得

在春季取萌发的沼湿草的小芽，除去叶片，用自来水冲洗1h，再于超净工作台上，依次利用质量浓度为70％的乙醇浸泡10s，体积浓度为0.5‰的汞浸泡10min，再用无菌水冲洗4次，利用无菌滤纸吸干小球茎表面的水分后，将小球茎切成0.5cm的带腋芽的节段，节段接种于包括MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L的腋芽诱导培养基上；

(2)芽的分化和增殖