[发明专利]早期预测慢性乙肝发展成肝硬化的hsa-mir-122试剂盒及检测方法无效
申请号: | 200910051493.0 | 申请日: | 2009-05-19 |
公开(公告)号: | CN101555520A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 孙树汉;张毅;贾音;费明钰 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 | 代理人: | 丁振英 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 早期 预测 慢性 乙肝 发展 肝硬化 hsa mir 122 试剂盒 检测 方法 | ||
1、一种早期预测慢性乙型肝炎发展成肝硬化的hsa-mir-122检测试剂盒,其特征在于该试剂盒包括
hsa-mir-122反转录引物,序列如SEQ ID NO:1所示;
Real-time PCR上游引物,序列如SEQ ID NO:2所示;
Real-time PCR下游引物,序列如SEQ ID NO:3所示。
2、根据权利要求1所述的一种早期预测慢性乙型肝炎发展成肝硬化的hsa-mir-122检测试剂盒,其特征在于该试剂盒主要由以下试剂组成:
A)hsa-mir-122反转录引物,序列如SEQ ID NO:1所示,1管,浓度:10μM,100μl/管;
B)Real-time PCR上游引物,序列如SEQ ID NO:2所示,1管,浓度:10μM,100μl/管;
Real-time PCR下游引物,序列如SEQ ID NO:3所示,1管,浓度:10μM,100μl/管;
C)Trizol reagent,1管,2000μl/管;
D)氯仿,1管,500μl/管;
E)无水乙醇,1管,7ml/管;
F)DEPC H2O,1管,1000μl/管;
G)dd H2O,1管,2000μl/管。
3、一种如权利要求1所述的早期预测慢性乙型肝炎发展成肝硬化的hsa-mir-122检测试剂盒的检测方法,其特征在于该检测方法包括以下步聚:
按常规抽血取血清或血浆,用总RNA提取试剂处理血清或血浆,加氯仿离心后取上层水相,并富集血清或血浆中的小RNA;由反转录系统反转录hsa-mir-122成cDNA;用扩增系统进行Real-time PCR扩增,测定hsa-mir-122含量。
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